一、概述

赛默飞 Multiskan FC 是一款经典的滤光片型酶标仪，在免疫分析、蛋白质定量、核酸检测、细胞实验及酶动力学研究等领域有着广泛应用。在使用该仪器进行检测时，板孔布局（Plate Layout） 是实验设计中非常重要的环节。
板孔布局不仅仅是将样品、标准品、对照组、空白组合理分配到微孔板上，更是保证数据准确性、可重复性和实验效率的关键。通过合理规划板孔布局，实验人员可以有效减少系统误差、提升分析速度，并便于后续数据处理。

二、板孔布局的重要性

1. 减少操作错误
   在软件中预先设定布局，有助于在加样时快速确认位置，降低孔位混淆风险。

2. 提高数据一致性
   统一布局可减少实验间的批间差，使数据更具可比性。

3. 优化检测流程
   科学的布局可以减少边缘效应、温度梯度等对检测结果的影响。

4. 便于数据分析
   软件能够根据布局自动识别各孔功能，直接生成统计结果和曲线图。

三、微孔板基础知识

Multiskan FC 主要适配标准微孔板，包括：

• 96 孔板：最常用，8 行（A–H）× 12 列（1–12）。

• 384 孔板（部分型号支持）：16 行 × 24 列，用于高通量检测。

孔位编号方式一般为字母标记行，数字标记列（例如 A1、B3、H12），以便快速定位。

四、板孔布局设计原则

1. 功能分区明确

• 空白孔（Blank）：用于背景扣除。

• 标准孔（Standard）：用于绘制标准曲线。

• 对照孔（Control）：用于比较实验组与基准状态。

• 样本孔（Sample）：待测样品。

2. 重复测量
   每个样本或标准应设至少双孔或三孔重复，以评估重复性和稳定性。

3. 对称性布局
   相同组别尽量在板的不同区域分布，减少位置效应。

4. 边缘效应控制
   边缘孔易受蒸发、温差影响，可加缓冲液或设为空孔。

五、Multiskan FC 板孔布局功能特点

1. 可视化布局编辑
   软件提供直观的网格界面，用户可点击或批量选择孔位进行标记。

2. 批量设定属性
   一次性选中多个孔并赋予相同功能，提高布局速度。

3. 模板化管理
   可将常用布局保存为模板，重复实验可直接调用，保持一致性。

4. 颜色编码标识
   不同功能孔可用不同颜色标记，便于快速识别。

5. 布局与分析联动
   数据采集后，软件自动按布局分类计算并生成分析结果。

六、常见板孔布局示例

1. ELISA 实验布局（96 孔板）

• A1–A3：空白孔

• B1–B3：零标准孔

• C1–H1：标准曲线系列浓度（梯度稀释）

• 其他孔：样品孔，分批检测

2. 蛋白定量实验（BCA 法）

• A1–A2：空白

• B1–G1：不同浓度标准品

• 其余孔：未知样品，每样双孔重复

3. 核酸纯度检测（260/280）

• A1–A2：空白（ddH₂O）

• B1–B2：标准 DNA 样品

• 其他孔：实验 DNA 样品

七、布局对实验质量的影响

1. 标准曲线准确性
   合理的布局能避免标准孔集中在受温度影响大的区域，从而提高曲线线性度。

2. 重复性与统计学效力
   适当的重复孔布局有助于发现并剔除异常值，提高结果可靠性。

3. 边缘效应降低
   通过缓冲液填充边缘孔，可减少蒸发对浓度的影响。

八、板孔布局的操作步骤（以 Multiskan FC 软件为例）

1. 选择板型
   在实验设置中选择 96 孔或其他适用板型。

2. 编辑布局

• 单击或拖拽选择孔位

• 在功能区设定为空白、标准、对照或样本

3. 分配组别
   为样本设定分组名称，方便后续分析。

4. 保存模板
   以实验类型命名模板，便于下次直接调用。

5. 确认并应用
   在正式采集前再次核对孔位功能是否正确。

九、布局优化技巧

1. 随机化设计
   对样本排列进行适度随机化，减少系统偏差。

2. 对称放置标准孔
   将同一浓度标准孔放在板的不同位置，验证位置一致性。

3. 减少环境干扰
   边缘孔可加 PBS 或蒸馏水防止蒸发影响。

4. 结合批量设置功能
   大量重复孔可用批量命令一次性完成标记。

十、在不同实验中的应用价值

1. 免疫检测
   精确的布局有助于快速绘制标准曲线，提升 ELISA 定量精度。

2. 酶动力学分析
   利用布局设计控制不同组别反应的启动顺序，保证曲线的可比性。

3. 药物筛选
   高通量布局可在一块板上测试多个化合物，提高筛选效率。

4. 环境与食品检测
   统一布局模式方便批量检测与结果比对。

十一、常见问题与解决方案

1. 布局与加样顺序不符

• 解决方法：加样前核对板孔布局与加样计划表。

2. 颜色标记混淆

• 使用高对比度颜色并在实验记录中注明。

3. 模板导入失败

• 检查板型是否一致，确保模板与当前实验匹配。

4. 边缘孔数据异常

• 用缓冲液填充或在分析中剔除边缘孔数据。

十二、总结

赛默飞 Multiskan FC 的板孔布局功能不仅是一个操作环节，更是确保实验结果准确性与可重复性的核心部分。通过科学的布局设计、合理的孔位功能分配以及模板化管理，用户可以显著提高实验效率并降低误差。在结合随机化、对称布局及边缘效应控制等策略后，该功能在免疫分析、核酸定量、蛋白测定和高通量筛选等不同类型实验中都能展现出优越的适配性和实用价值。