一、概述

赛默飞 Multiskan SkyHigh 是一款全波长酶标仪，在光学性能、温控精度、检测灵敏度等方面具备出色表现。而在使用过程中，板孔布局（Plate Layout） 功能是一个极为重要的环节。
板孔布局不仅关系到实验设计的科学性，还直接影响数据采集、分析以及结果解释的效率与准确性。它是将实验样本、标准品、对照组、空白组等合理分布在微孔板上，并在软件中建立对应的孔位映射关系的过程。
Multiskan SkyHigh 在板孔布局设计上提供高度的自定义功能，用户可根据实验类型、检测模式和分析需求自由设定孔位用途，确保实验流程高效、结果可靠。

二、板孔布局的意义

1. 提高实验效率
   合理的板孔布局能够最大化利用孔位，减少浪费，同时简化操作流程。

2. 减少人为错误
   在软件中提前规划布局，可以避免样本加错孔、对照组位置混乱等问题。

3. 便于数据分析
   软件可根据布局自动识别每个孔的实验类型，直接生成分析曲线和统计结果。

4. 支持多种实验模式
   不同实验（如 ELISA、酶动力学、核酸定量等）对布局要求不同，系统化的布局功能可灵活适配。

三、微孔板类型与布局基础

Multiskan SkyHigh 兼容多种标准微孔板：

1. 96 孔板
   最常用的板型，孔径和间距符合 ANSI/SBS 标准。

2. 384 孔板
   用于高通量筛选，孔间距更小。

3. 24 孔、48 孔板
   适用于样本量大或需要较长光程的检测。

布局的基本要素包括：

• 行列编号：通常用字母标记行（A–H），数字标记列（1–12）。

• 孔位功能定义：空白、标准、对照、样本等。

• 重复设置：相同条件下的重复孔数量。

四、板孔布局的设计原则

1. 对称性原则
   相同实验组应对称分布在板上，以减少位置效应带来的误差。

2. 随机化原则
   样本顺序随机化可以降低系统误差对结果的影响。

3. 边缘效应控制
   微孔板边缘孔可能因温度、蒸发等原因产生差异，必要时可设置为缓冲孔或空孔。

4. 重复性保障
   每个样本至少设置双孔或三孔重复，以评估实验稳定性。

五、Multiskan SkyHigh 板孔布局功能特点

1. 可视化编辑界面
   软件提供直观的孔位网格图，用户可通过点击、拖拽快速设定孔位类型。

2. 批量标记功能
   支持一次性选中多个孔并设定相同属性，节省布局时间。

3. 预设模板库
   内置常用实验的布局模板，如 ELISA 标准曲线布局、核酸定量布局等，可直接调用。

4. 自定义分组
   用户可自定义样本组名和颜色标识，方便在数据分析阶段快速区分。

5. 布局与数据自动匹配
   软件在采集数据时，会自动按照预设布局对每个孔进行归类并关联分析参数。

六、常见布局示例

1. ELISA 实验布局

• A1–A3：空白孔

• B1–B3：零标准孔

• C1–H1：标准曲线系列浓度（梯度稀释）

• 其余孔：样本检测

2. 核酸定量布局

• A1–A2：空白孔（ddH₂O）

• B1–B2：标准品高浓度

• C1–C2：标准品中浓度

• D1–D2：标准品低浓度

• 其他孔：未知样品

3. 动力学检测布局

• 边缘孔：缓冲液

• 中间区域：实验样本与对照

七、板孔布局对数据质量的影响

1. 减少批间差
   统一布局模式可减少不同实验之间的系统误差。

2. 优化光路检测
   布局对光路扫描顺序的优化可缩短检测时间，减少样本信号衰减。

3. 降低背景噪声
   合理安排空白孔，有助于进行背景扣除，提高信噪比。

八、板孔布局的操作步骤（以 SkyHigh 软件为例）

1. 打开布局编辑器
   在软件主界面选择“新建实验”并进入“板孔布局”模块。

2. 选择板型
   根据实验使用的微孔板类型选择 96 孔、384 孔等。

3. 设定孔功能

• 单击或拖拽选择孔位

• 在属性面板中设置为样本、标准、空白等

4. 命名与颜色标记
   为不同分组设定名称与颜色，方便后续识别。

5. 保存布局模板
   可将当前布局保存为模板，供类似实验直接调用。

九、布局优化技巧

1. 边缘孔预防蒸发
   在长时间检测中，边缘孔可加无关缓冲液，减少蒸发效应。

2. 对称布局降低梯度效应
   将相同组别分布在不同区域，减轻因温度或光照不均造成的差异。

3. 统一重复孔分布
   保证重复孔在板上分布一致，方便计算平均值和标准差。

4. 结合软件自动化功能
   利用批量设定和模板功能快速生成布局，减少人工操作失误。

十、在不同实验中的应用价值

1. 免疫检测
   精确的布局有助于标准曲线拟合与定量分析，提高 ELISA 数据的线性度。

2. 酶动力学研究
   通过布局设计控制时间间隔与反应启动顺序，提高反应曲线的可比性。

3. 药物筛选
   高通量板孔布局可在一块板上测试多种化合物，提高筛选效率。

4. 基因检测
   合理布局标准品和阴阳性对照，提高检测特异性与准确性。

十一、常见问题与解决方案

1. 布局与加样顺序不一致

• 解决方法：在加样前对照布局图与加样计划表核对一次。

2. 导入布局模板出错

• 可能是板型不匹配，应确认模板与当前板型一致。

3. 边缘效应导致数据偏差

• 使用缓冲液填充边缘孔，或在分析中剔除异常孔。

4. 颜色标记混淆

• 使用高对比度色标，并在实验记录中明确说明颜色与组别对应关系。

十二、总结与展望

赛默飞 Multiskan SkyHigh 的板孔布局功能为实验提供了高度灵活、直观且智能化的设计平台。合理的布局不仅能提升实验效率和数据质量，还能减少误差、节约成本。随着实验室自动化水平的提升，未来的板孔布局有望与机器人加样系统、LIMS 数据管理系统深度整合，实现全自动化布局生成、加样与数据分析的闭环工作流程，这将进一步提高实验的可重复性与高通量能力。