1. 微孔板的基本结构与功能

微孔板是一种标准化的实验耗材，其结构由多个规则排列的小孔组成，每个小孔都可以独立容纳一定体积的样品或反应体系。Varioskan Flash可兼容不同规格和设计的微孔板，既可满足单一模式检测，也能应对多模式联合实验。

主要功能包括：

1. 样品反应载体：为生化反应提供独立、可控的反应空间。

2. 光学检测平台：通过透光底部或反射结构配合仪器光学系统进行光信号检测。

3. 高通量检测单元：一次性处理几十到上千个样品，提高工作效率。

2. 按孔数分类的微孔板类型

微孔板的孔数直接决定了单次检测的通量。Varioskan Flash可适配从低通量到超高通量的多种孔板。

2.1 96孔板

• 特点：最常用的规格，每孔体积一般在200~350 μL，兼容性强，适合多数生化、免疫和细胞实验。

• 优势：通量与操作便捷性的平衡点，便于加样、洗板和数据分析。

• 适用检测：ELISA、蛋白定量、细胞增殖、化学发光、普通荧光实验。

2.2 384孔板

• 特点：每孔体积一般在30~100 μL，通量是96孔板的4倍，适合高通量检测。

• 优势：节省试剂和样品，适合自动化加样系统。

• 适用检测：高通量药物筛选、基因表达分析、大规模酶学反应。

2.3 1536孔板

• 特点：每孔体积通常小于10 μL，超高通量，主要用于自动化设备。

• 优势：极大节省试剂用量，适合快速筛选大量样品。

• 适用检测：超高通量化合物筛选、微反应体系。

3. 按颜色分类的微孔板类型

微孔板的颜色会影响光信号的传递与背景干扰，因此在不同检测模式下应选用不同颜色的微孔板。

3.1 透明微孔板

• 特点：底部透明，透光率高。

• 适用模式：吸收光检测（如ELISA、蛋白定量）。

• 优点：光线可直接透过样品，确保吸光度检测的精度。

3.2 白色微孔板

• 特点：表面高反射率，能够增强光信号。

• 适用模式：化学发光检测。

• 优点：信号强度高、灵敏度提升，特别适合检测低浓度样品。

3.3 黑色微孔板

• 特点：光吸收能力强，可减少孔间串扰。

• 适用模式：荧光检测。

• 优点：降低背景干扰，提高信噪比。

3.4 混合型微孔板

• 特点：板体黑色或白色，底部透明或半透明。

• 适用模式：细胞荧光或发光实验，可在显微镜下直接观察。

• 优点：兼顾光学检测与显微成像。

4. 按底部结构分类的微孔板类型

底部结构的设计影响光学路径、细胞生长和样品沉淀情况。

4.1 平底板（Flat Bottom）

• 特点：底部平坦，光路均匀。

• 适用检测：吸收光检测、细胞培养、荧光检测。

4.2 圆底板（Round Bottom）

• 特点：底部弧形，有利于颗粒聚集。

• 适用检测：免疫沉淀、细胞悬浮培养。

4.3 U型底板

• 特点：底部呈半球形，有助于反应物集中。

• 适用检测：血凝实验、免疫学检测。

4.4 V型底板

• 特点：底部呈V字形，利于液体聚集。

• 适用检测：样品回收、沉淀反应。

5. 按表面处理分类的微孔板类型

微孔板的表面处理直接影响生物分子的吸附、细胞的附着及生长状态。

5.1 高结合力（High Binding）表面

• 特点：增强蛋白质、抗体等大分子的结合能力。

• 适用检测：ELISA、免疫吸附实验。

5.2 低结合力（Low Binding）表面

• 特点：减少小分子、核酸等的非特异性吸附。

• 适用检测：分子回收实验、低浓度样品检测。

5.3 细胞培养处理表面

• 特点：表面经过组织培养处理（TC处理），有利于贴壁细胞附着与生长。

• 适用检测：细胞增殖、毒性实验、形态观察。

5.4 亲水或疏水处理表面

• 亲水表面：有助于水相体系的均匀分布。

• 疏水表面：减少水相物质吸附，适合有机相实验。

6. 微孔板的选择原则

在使用Varioskan Flash时，应结合实验类型、检测模式和信号特性选择合适的微孔板。

1. 检测模式优先：

• 吸收光：透明板

• 荧光：黑色板

• 发光：白色板

2. 通量与样品量平衡：

• 样品有限：选用高通量孔板（384或1536孔）

• 样品充足：可选96孔板操作更方便

3. 光学匹配性：
   确保微孔板材质与仪器光学系统匹配，避免信号损失。

4. 细胞实验兼容性：
   选择细胞培养处理板，保证细胞附着和形态稳定。

5. 减少串扰与背景：
   荧光实验避免透明板，发光实验避免黑色板。

7. 应用案例

案例1：ELISA抗体检测

• 板型：透明高结合力96孔板

• 理由：吸收光检测需要高透光率，高结合力确保抗原充分吸附。

案例2：药物高通量筛选

• 板型：黑色384孔板

• 理由：减少孔间荧光串扰，提高筛选信噪比。

案例3：细胞毒性检测

• 板型：黑色透明底细胞培养板

• 理由：可进行实时荧光检测并显微观察细胞形态。

案例4：化学发光免疫分析

• 板型：白色96孔板

• 理由：反射增强发光信号，提升灵敏度。

8. 总结

在赛默飞Varioskan Flash的使用过程中，微孔板的选择与实验成功率和数据质量密切相关。

• 从孔数上看，96孔板适合常规实验，384/1536孔板适合高通量筛选；

• 从颜色上看，透明板用于吸收光，黑色板用于荧光，白色板用于发光；

• 从底部结构上看，平底适合大多数光学检测，圆底/U型底适合沉淀类实验；

• 从表面处理上看，高结合力适合蛋白结合，低结合力适合减少非特异吸附，TC处理适合细胞实验。

正确选择微孔板，不仅能提高Varioskan Flash的检测灵敏度与重复性，还能节省试剂、减少实验误差，使其在科研、医疗、药物研发和环境监测等领域发挥最大效能。