Thermo Scientific Multiskan Ascent 酶标仪是一款用于微孔板检测的经典设备,配套的 Ascent 软件为数据采集与记录提供了完整平台。为了确保实验数据的可靠性、可追溯性与合规性,对检测数据的记录、保存、分析和管理具有重要意义。
本资料将从操作流程、数据采集、记录方式、文件管理、结果导出与分析处理、符合GLP/GMP要求的记录规范等多个方面,对 Multiskan Ascent 酶标仪的数据记录机制进行系统阐述。
Multiskan Ascent 酶标仪配套使用 Ascent Software,是专门用于酶联免疫吸附实验、酶活性测定、蛋白定量、细胞毒性检测等多种检测的控制与数据采集软件。其核心工作机制为:
用户在软件中设置检测参数;
仪器完成微孔板光密度检测;
检测结果通过串口/USB接口上传至计算机;
Ascent 软件实时记录每孔OD值;
系统自动执行设定的数据处理(背景扣除、平均值、标准差等);
用户可保存、导出、分析结果。
每次读板实验产生的数据通常包括:
实验参数(波长、读数模式、延迟时间等);
板型与孔位定义(空白孔、标准孔、样本孔);
原始吸光度(OD)数据;
处理后数据(如减去空白、对照归一化);
标准曲线与拟合值(如适用);
系统时间、操作人、样本编号等元信息。
Ascent 软件主要由以下功能模块组成:
模块名称 | 功能说明 |
---|---|
Protocol Setup | 设置波长、模式、摇板、延迟等参数 |
Plate Layout | 定义每个孔的属性与样本编号 |
Measurement | 控制酶标仪开始读取、实时显示数据 |
Data Analysis | 自动计算平均值、标准差、浓度等 |
Report Generation | 输出可打印的实验报告 |
Export | 导出至 Excel、CSV、PDF 等格式 |
检测过程中,软件会在屏幕表格中实时显示各孔吸光度值。记录格式为:
Well | OD@450nm | OD@620nm | ΔOD | Status |
---|---|---|---|---|
A1 | 1.234 | 0.102 | 1.132 | OK |
在设置了双波长检测时,软件自动记录两个波长下的OD值并进行计算(如主波长减参考波长)。
Multiskan Ascent 软件具备多项自动数据分析功能,在读板完成后系统可执行以下计算:
对于设置为“样本组”的孔位,系统会:
计算组内各孔OD的平均值;
给出标准差(SD)与变异系数(CV%);
标注高变异样本,提示可能的加样误差。
软件可选择:
用设定空白孔(Blank)的平均OD自动扣除背景;
或者在双波长条件下使用参考波长扣除背景影响。
如设置了标准浓度:
软件支持线性、对数、四参数Logistic等拟合方式;
自动绘制OD-浓度曲线图;
输出拟合系数、R²等统计指标;
按曲线反推样本浓度。
Multiskan Ascent 支持以下数据文件格式:
格式 | 用途 |
---|---|
.asc | 原始实验协议与数据记录(可用于再次打开修改) |
.xls/.csv | 导出数据分析结果(适合Excel或统计软件) |
.pdf/.doc | 实验报告格式,适合归档与打印 |
.txt | 文本格式结果,适合接口调用或批处理分析 |
为便于管理和追溯,建议采用统一文件命名规范,例如:
pgsql复制编辑ELISA_CRP_20250808_OperatorX.asc MTT_CellLineA_Replicate3.csv ProteinQuant_BCA_SampleSetB.pdf
原始数据文件(.asc)建议长期保留;
可按月/项目/实验类型分类保存;
建议配合实验记录表,标注样本编号与处理方式;
对于GMP环境,应设置只读权限,防止修改原始数据。
导出功能是 Multiskan Ascent 软件的重要组成部分:
实验完成后,点击“Export”按钮;
选择导出格式(Excel/CSV/PDF);
设置导出内容(原始OD值、处理后数据、曲线图、孔位图等);
选择导出路径,命名文件;
确认无误后点击“Export”完成导出。
原始OD数据;
各孔属性与编号;
空白值、平均值、标准差、CV值;
标准曲线图与拟合参数;
自动计算浓度值;
板位布局图与颜色标记。
为保证实验数据可信、准确与合规,应建立数据记录质量管理体系:
检查环节 | 检查内容 |
---|---|
试剂准备 | 检查试剂批号、有效期、保存条件 |
微孔板准备 | 确认孔板洁净无污染、液面一致 |
波长设置 | 核对主波长与参考波长是否正确匹配底物 |
孔位定义 | 核对是否设置空白/对照/标准孔 |
仪器状态 | 校验光源亮度、滤光片位置与灯泡使用时间 |
读数过低:标注“LO”;
读数超出范围:标注“HI”;
重复孔差异大:系统标记为“VAR”或“Error”;
缺失值自动标“ND”或“Empty”。
建议每份数据导出后,填写实验记录表,标注操作人、审核人、日期;
在有GLP/GMP要求的实验中,应使用具有审计追踪功能的软件版本(如Multiskan FC或连接LIMS系统);
Multiskan Ascent 导出的数据文件(如 .csv)可无缝衔接至多种统计与可视化工具,如:
Excel:绘制标准曲线、趋势图、分组柱状图;
GraphPad Prism:非线性曲线拟合、方差分析;
SPSS / R:进行假设检验、组间比较、回归建模;
Python / MATLAB:进行大批量数据自动化处理。
通过上述工具配合 Multiskan Ascent 平台的数据结构,可以实现全流程的实验数据电子化、分析可视化、结果标准化。
对于执行GLP、GMP、ISO 17025等质量体系的实验室,Multiskan Ascent 数据管理应包含以下方面:
原始数据只读保护,防止擅自修改;
软件操作日志记录用户权限与操作记录;
文件命名与版本控制,确保可追溯性;
每次实验数据需记录检测时间、人员、试剂批次;
导出的报告文件应存档不少于5年;
实验失败的读板记录也应存档备查。
Multiskan Ascent 酶标仪的数据记录体系已覆盖实验全过程的数据采集、处理与管理要求,为实验人员提供了清晰、直观、规范的记录平台。通过标准操作流程与质量控制机制的执行,不仅可有效提升实验结果的科学性与可重复性,更有助于满足科研项目、临床检测或药品研发等领域对数据合规的严格要求。
为进一步规范使用,建议实验室:
制定统一的数据记录模板与文件命名规则;
定期培训操作人员掌握软件使用技巧;
建立集中存储与自动备份系统;
根据项目需求将数据接口扩展至LIMS系统。
杭州实了个验生物科技有限公司