一、设备简介

赛默飞酶标仪Varioskan Flash是一款多模式微孔板检测系统，可进行吸光度（Abs）、荧光强度（FI）、发光（Lum）、时间分辨荧光（TRF）等多种光学检测。设备集成了宽波长范围的光源、双单色仪系统、高灵敏探测器及自动化控制模块，兼容多种板型（96孔、384孔、比色皿），适合生命科学、药物筛选、食品安全、环境检测等实验。

核心特点：

• 多模式检测：无需更换硬件即可切换检测模式。

• 宽波长范围：200–1000 nm连续波长选择。

• 自动化功能：自动切换光路、温控、振荡混匀等。

• 高灵敏度与稳定性：适合低浓度分析及高通量筛选。

二、使用前准备

1. 安装与摆放

• 将仪器放置在稳固、平整的实验台上，远离振动源和强光直射。

• 确保通风良好，环境温度建议为18–30℃，湿度不高于80%。

• 预留仪器后侧与墙面的空间（≥10 cm）以利散热。

2. 电源与接口

• 使用额定电压匹配的交流电源（一般为100–240 V，50/60 Hz）。

• 检查电源线与接地连接是否完好。

• 将仪器与控制电脑通过USB或以太网连接，确保驱动与软件（SkanIt）安装正确。

3. 开机与预热

• 按下电源开关，仪器自检后进入待机状态。

• 根据检测模式不同，建议预热3–15分钟（荧光/时间分辨荧光时间较长）。

• 同步打开SkanIt软件，确认仪器状态正常。

4. 实验耗材准备

• 根据实验选择96孔板、384孔板或比色皿。

• 使用光学质量符合检测要求的耗材（低自发荧光、平整透明底部）。

• 准备所需试剂、样品和标准品。

三、操作步骤

1. 创建或选择检测方法

• 在SkanIt软件中新建方法文件，或从已有方法中调用。

• 选择检测模式（Abs/FI/Lum/TRF），并设定所需参数：

• 波长设置：单波长、多波长或光谱扫描。

• 积分时间：影响信号强度与灵敏度。

• 读板模式：单次读取、连续读取、区域扫描等。

• 温控：设定恒温（如37℃）。

• 振荡混匀：设定振荡方式和时间。

• 在板布局界面标记样品孔、标准孔、空白孔和控制孔。

2. 样品加载

• 按实验设计在微孔板相应孔中加入样品与试剂。

• 确保加样体积一致，避免产生边缘效应。

• 检查是否有气泡，必要时用移液器轻轻破除。

3. 放入微孔板

• 打开仪器板架，放入微孔板或比色皿。

• 确保板方向正确（一般以A1孔位在左上角）。

• 推入板架直至完全闭合。

4. 运行检测

• 在软件中点击“开始”或“Run”按钮，系统会自动执行设定的检测流程。

• 检测过程中可在软件实时监控信号变化或温控状态。

• 完成后，结果将显示在软件界面并自动保存。

5. 数据分析

• 使用SkanIt内置工具进行数据处理：

• 背景扣除（空白孔信号减去）。

• 标准曲线拟合（线性、四参数、五参数等）。

• 计算未知样品浓度。

• 可导出数据至Excel、PDF或其他格式，便于后续处理。

四、维护与保养

1. 日常维护

• 检测结束后及时取出微孔板，防止试剂挥发腐蚀内部。

• 用无尘布擦拭外壳，不得使用强腐蚀性溶剂。

• 定期检查板架、光路窗口是否有污渍，必要时用光学清洁纸轻轻擦拭。

2. 光源维护

• 光源有使用寿命（如氙灯数百至上千小时），光强下降明显时需更换。

• 更换光源应按官方操作指南执行，防止损坏光学系统。

3. 软件与固件更新

• 定期检查SkanIt软件版本与仪器固件，保持系统兼容性与功能更新。

4. 定期校准

• 使用厂家提供的校准板或标准溶液，对吸光度、波长、荧光灵敏度等进行定期校正，确保数据准确。

五、常见问题与处理

1. 仪器无法连接电脑

• 检查USB/网络线连接与驱动安装。

• 重启软件和仪器，尝试更换接口。

2. 光强或信号异常

• 检查光源使用时间，必要时更换。

• 确认微孔板干净，无划痕或污染。

• 检查背景值，排除环境光干扰。

3. 温控不稳定

• 检查仪器散热空间是否充足。

• 确认温控设定与实际室温差异，适当延长预热时间。

4. 数据波动大

• 确保加样一致性与板内混匀充分。

• 检查板底是否有气泡，必要时消除。

• 确认光路窗洁净且无灰尘。

六、安全注意事项

• 操作仪器时应遵守实验室安全规范。

• 避免在光源开启状态下直接观察光束，防止眼睛受损。

• 处理生物样品或化学试剂时佩戴防护手套、护目镜。

• 定期备份实验数据，防止意外丢失。

七、附加操作技巧

1. 多模式联用
   在同一次检测中可串联不同模式，例如先测吸光度，再测荧光，以获得更多信息。

2. 光谱扫描优化
   对未知荧光染料先做激发/发射扫描，找到最佳波长后再批量检测。

3. 时间分辨荧光的延迟设置
   合理设置延迟和积分时间，可有效消除短寿命背景荧光干扰。

4. 批量方法调用
   对于常规项目可保存方法模板，直接调用减少重复设置时间。

八、总结

赛默飞酶标仪Varioskan Flash使用流程可概括为：准备 → 方法设定 → 样品加载 → 检测运行 → 数据分析 → 维护保养。
其多模式检测能力、灵活的软件控制以及稳定的光学性能，使其能适应从基础研究到高通量筛选的多种需求。熟悉并遵守使用说明，不仅能提高实验效率，还能延长设备寿命、保障数据准确性。