一、操作前准备

在正式使用 Multiskan Ascent 前，需要确认环境条件、设备状态及实验材料。

1. 环境条件检查

• 温度：保持在 20–25 ℃，波动 ≤ ±2 ℃

• 湿度：40–60% RH，无凝露

• 电源：220–240 V AC，50–60 Hz，接地良好

• 摆放：设备置于平稳、防震、防潮的工作台，背后留 ≥10 cm 散热空间

2. 仪器外观与硬件检查

• 检查电源线、通讯线无破损

• 滤光片组安装牢固、表面清洁无划痕

• 托盘运行轨道无异物，表面清洁

• 光源牢固安装，灯丝完好

3. 软件与数据准备

• 启动 Multiskan Ascent 控制软件，确认与仪器通讯正常

• 调用或创建检测方法文件

• 准备板型布局文件（空白、标准、样品、质控孔标记）

4. 样品与耗材

• 标准 96 孔板（平底或圆底根据实验要求）

• 样品及试剂准备完成，液面一致，无气泡

• 板盖或封板膜，防止蒸发与污染

二、开机与初始化

1. 开机顺序

• 打开仪器电源 → 启动电脑 → 打开控制软件

• 设备上电后进行自检，托盘归位

2. 光源预热

• 光源预热 10–15 分钟，以保证光强稳定

3. 波长确认

• 检查滤光片组合，确认与实验所需波长一致（常用如 450 nm 主波长 + 620 nm 辅波长）

三、检测模式选择

Multiskan Ascent 支持多种检测模式，操作步骤中需根据实验选择合适模式。

1. 终点法（End-point）

• 适用：ELISA、终止式酶反应

• 设置：

• 主波长与辅波长

• 摇匀时间与幅度

• 读取速度（标准、快速）

2. 动力学法（Kinetic）

• 适用：酶活性检测、反应动力学分析

• 设置：

• 读数间隔（如 30 秒）

• 总测量时间（如 10 分钟）

• 多波长或单波长选择

3. 多波长法（Multi-wavelength）

• 适用：双波长背景扣除、多指标检测

• 设置：

• 多个波长顺序

• 软件自动计算扣除值

四、方法与板型设置

1. 板型布局编辑

• 在软件板图编辑器中标记：

• 空白孔（Blank）

• 标准品孔（Std）

• 样品孔（Sample）

• 质控孔（QC）

• 保存为模板，便于重复实验调用

2. 方法参数设定

• 测量模式：终点法、动力学法或多波长法

• 波长设置：主波长与辅波长

• 摇匀参数：时间与幅度

• 数据处理方式：空白扣除、曲线拟合类型（线性、四参数、五参数等）

• 报告格式与导出路径

五、样品加载与检测执行

1. 上板

• 将微孔板放入托盘定位槽，确保方向与软件板型一致

• 液面平整，无气泡；如有气泡可用无菌针轻轻破除

2. 启动测量

• 点击“Start”或“Measure”，托盘自动进入仪器

• 仪器按预设顺序逐孔扫描，软件实时显示 OD 值

3. 监控检测过程

• 观察进度条与实时数据

• 异常值出现时，可暂停检测并检查样品状态

六、数据处理与结果分析

1. 空白校正

• 软件自动扣除空白孔 OD 值，修正背景干扰

2. 标准曲线绘制

• 根据标准品浓度与修正后的 OD 值绘制曲线

• 拟合方式可选线性、四参数（4PL）、五参数（5PL）、对数回归等

• 检查相关系数 R²，通常需 ≥0.99

3. 样品浓度计算

• 软件根据拟合方程换算样品浓度

• 超出线性范围的样品需稀释复测

4. 数据审核与导出

• 审核异常值，标记或剔除

• 导出为 Excel、PDF 或 LIMS 兼容格式

• 保存原始数据与方法文件以备溯源

七、关机与日常维护

1. 取出板与清洁

• 检测结束后托盘自动推出，取出微孔板

• 用无绒布擦拭托盘表面，防止液体残留腐蚀

2. 软件与仪器关闭

• 保存数据并关闭软件

• 关闭仪器电源，长时间不使用时切断电源线

3. 日常保养

• 每周检查滤光片与光源状态

• 每月进行波长与吸光度校准

• 每半年进行光学系统清洁（由专业人员完成）

八、常见问题与操作注意事项

1. OD 值异常

• 检查波长设置与滤光片对应关系

• 确认液面一致，无气泡

2. 读数重复性差

• 检查托盘定位精度

• 样品加液操作是否均匀

3. 通讯故障

• 检查数据线连接与驱动安装

• 重启软件与仪器

4. 曲线拟合不良

• 检查标准品配制浓度与加样顺序

• 确认反应时间与终止条件

九、二手设备操作特别提示

• 首次使用前应进行性能测试（波长、吸光度准确性、重复性、线性）

• 检查光源寿命，必要时更换

• 确认滤光片透光率与波长准确性

• 确保软件版本与操作系统兼容

十、结语

Multiskan Ascent 酶标仪的操作流程涉及环境检查、方法设置、样品检测、数据分析和维护保养等多个环节。标准化执行每一步，不仅能提升数据的准确性与可重复性，还能延长设备的使用寿命。对于执行 GLP、GMP 或 ISO 17025 的实验室，将本文流程直接转化为 SOP，可显著提高质量管理和审计应对能力。