一、概述

赛默飞（Thermo Scientific）Multiskan GO 酶标仪是一款高性能全波长微孔板光度计，支持从紫外到可见光的 200–1000 nm 波长范围测量，适合 ELISA、酶动力学、细胞密度、蛋白质和核酸定量等多种应用。掌握其正确的使用方法，能够充分发挥仪器性能，保证实验数据的准确性与可重复性。本说明将对 Multiskan GO 的操作流程进行全面介绍，包括开机准备、实验设置、运行测量、数据分析与保存、关机及日常维护。

二、使用前准备

1. 环境检查

• 确认设备放置在平稳、防震的实验台上，避免邻近设备产生振动干扰。

• 环境温度保持在 10–30℃，相对湿度不超过 80%，避免阳光直射和空调出风口直吹。

• 保持周围空气清洁，减少灰尘对光学系统的影响。

2. 电源与连接

• 接入稳定电源（110–240V AC，50/60 Hz），电源插座需接地。

• 若需通过计算机控制，确保 USB 线或网络连接完好，并已安装 Multiskan GO 配套软件（如 SkanIt）。

3. 试剂与样品准备

• 按实验方案配制试剂，保证浓度和体积准确。

• 样品分装于微孔板中，体积应与实验要求一致，避免溢出或气泡。

• 检查微孔板清洁度，避免底部有划痕或污渍。

三、操作步骤

1. 开机

• 打开电源开关，等待仪器完成自检。

• 检查显示屏或连接软件的状态提示，确认光源、光学系统正常。

2. 创建实验方法

• 打开 SkanIt 软件或使用仪器面板菜单进入方法设置界面。

• 选择测量类型：端点、动力学、光谱扫描等。

• 设定测量波长：

• 单波长：输入所需检测波长。

• 双波长：设定主波长与参考波长。

• 扫描模式：设定起始波长、终止波长与间隔。

• 设定读取速度、读数次数、搅拌方式（如有）和温控参数（如需温控）。

3. 设置孔板布局

• 在软件中定义孔板布局，包括样品孔、标准品、空白孔、对照孔等。

• 对于标准曲线实验，输入各标准品的浓度值，软件会自动生成浓度—吸光度关系。

4. 装载微孔板

• 打开托盘，将已加样的微孔板放入，确保方向正确（通常左上角为 A1 孔）。

• 轻轻放置，避免剧烈碰撞托盘。

• 关闭托盘，确保完全锁定到位。

5. 运行测量

• 在软件或仪器面板中点击“开始”。

• 测量过程中避免震动和干扰。

• 对于动力学测量，应在反应启动后立即运行，以捕捉初始反应速率。

四、数据处理与保存

1. 实时数据监控

• 软件会实时显示吸光度（OD）或透射率曲线。

• 动力学模式下，可查看反应速率变化。

2. 数据分析

• 软件可自动计算标准曲线、样品浓度、反应速率等。

• 支持多种拟合方式（线性、四参数、五参数等）。

• 可对数据进行背景扣除、平滑处理、重复值平均等操作。

3. 数据导出与保存

• 数据可导出为 Excel、PDF 或文本文件。

• 保存实验方法以便重复使用。

• 重要实验数据需备份到实验室服务器或外部硬盘。

五、常见应用操作示例

1. ELISA 端点法

• 设定主波长（如 450 nm）与参考波长（如 620 nm）。

• 在方法中设置标准品浓度与样品孔位。

• 测量结束后，软件自动绘制标准曲线并计算样品浓度。

2. 酶动力学测定

• 选择动力学模式，设定测量波长（如 340 nm）。

• 设置测量间隔（如每 10 秒）和总时间（如 5 分钟）。

• 测量反应过程中吸光度随时间变化，并计算初始速率。

3. 蛋白质定量（Bradford 法）

• 设定测量波长（595 nm）。

• 定义标准曲线孔位与样品孔位。

• 测量并计算样品浓度。

六、使用注意事项

1. 避免气泡：气泡会影响光路，导致读数异常。加样后可轻轻敲击孔板底部消除气泡。

2. 温控稳定：对温度敏感的反应，应提前预热仪器。

3. 波长匹配：确保选择的检测波长与反应产物的最大吸收峰一致。

4. 及时读取：时间敏感实验应减少加样与读数间的延迟。

5. 孔板选择：使用与仪器光路匹配的透明、平底微孔板。

七、关机与日常维护

1. 关机步骤

• 测量结束后，退出软件。

• 关闭电源前，取出微孔板，保持托盘关闭。

• 关闭电源开关，必要时切断总电源。

2. 清洁保养

• 使用干净、柔软的无纤维布擦拭外壳。

• 光学窗口如有污渍，可用镜头纸和适配溶剂轻轻擦拭。

• 定期运行厂商提供的校准程序，确保光学精度。

3. 光源维护

• 光源属于易耗件，使用寿命有限，应根据累计使用时间更换。

• 更换光源时遵循厂商说明，避免触摸灯泡表面。

八、常见问题与排查

1. 读数异常波动

• 检查样品是否混匀，微孔板是否有划痕。

• 检查光路是否清洁。

2. 光源错误提示

• 检查光源安装与接触。

• 若光源老化，及时更换。

3. 软件无法连接仪器

• 检查数据线和驱动程序。

• 重启仪器与软件。

九、总结

正确掌握 Multiskan GO 酶标仪的使用方法，需要从实验准备、参数设置、测量运行到数据处理的全过程入手。遵循规范的操作流程，不仅能保证数据的精度与可靠性，还能延长仪器的使用寿命。在日常实验中，根据不同检测类型合理选择测量模式与波长，并结合软件的数据分析功能，可以高效完成从基础检测到复杂实验的各种任务。