一、培训目标与意义

赛默飞（Thermo Scientific）Multiskan Ascent 酶标仪是一款广泛应用于 ELISA、酶活性检测、蛋白定量分析、细胞实验等领域的光学检测设备。
本培训旨在帮助新用户和维护人员熟练掌握 Multiskan Ascent 的正确操作方法，理解其光学原理和软件功能，确保实验数据准确可靠，同时延长设备的稳定使用寿命。

培训的核心目标包括：

1. 理解设备的结构与工作原理。

2. 熟练掌握开机、预热、测量和关机的标准流程。

3. 掌握 Ascent 软件的主要功能与设置方法。

4. 能够规范操作样品与酶标板，减少实验误差。

5. 掌握常见故障的排查方法与日常维护技巧。

二、设备结构与工作原理

1. 主要组成部分

• 光学系统：包括光源、滤光片、透镜、光路引导和光电检测器。

• 机械传动系统：控制酶标板在检测过程中的精确移动与定位。

• 板托：固定酶标板，保证每个孔在光路下准确读取。

• 控制与信号处理模块：将光信号转换为数字信号，进行数据分析与输出。

• 外部接口：与计算机通讯，运行 Ascent 软件进行实验控制和数据处理。

2. 工作原理

酶标仪通过光源发出的特定波长光照射样品孔内液体，部分光被吸收，剩余光透过样品到达检测器。检测器将透射光信号转换为电信号，再经过处理得到样品的吸光度（OD 值）。
根据比尔-朗伯定律，OD 值与样品中显色物质的浓度成正比，通过对比标准曲线即可计算样品浓度。

三、开机与关机流程

1. 开机流程

1. 检查电源线和通讯线连接是否牢固。

2. 确认酶标板托内无异物。

3. 按下电源开关，设备启动后等待 15–20 分钟预热，使光源输出稳定。

4. 打开计算机并运行 Ascent 软件，确认仪器正常连接。

2. 关机流程

1. 完成所有测量任务并保存数据。

2. 关闭 Ascent 软件。

3. 按下电源开关关闭仪器，等待风扇停止运转。

4. 断开电源，必要时盖上防尘罩。

四、软件操作与功能培训

1. 软件主界面

Ascent 软件主界面包含菜单栏、工具栏、方法编辑区、结果显示区。

2. 常用功能模块

• 方法编辑：设置波长、读取模式、读取速度、背景扣除等参数。

• 标准曲线设置：输入标准品浓度，选择曲线拟合方式（线性、四参数等）。

• 样品布局：定义酶标板中各孔的样品类型（标准、空白、样品）。

• 数据读取：实时显示各孔 OD 值。

• 数据处理与导出：自动计算浓度，输出 Excel 或 PDF 报告。

3. 软件操作流程示例

1. 新建方法 → 选择波长（如 450 nm） → 设置读取模式（单波长或双波长）。

2. 定义酶标板布局（标准品位置、样品孔、空白孔）。

3. 保存方法文件。

4. 放入酶标板，点击“读取”开始检测。

5. 查看并导出检测结果。

五、实验操作标准流程

1. 样品准备

• 使用统一规格的 96 孔酶标板。

• 加液体积一致，避免气泡产生。

• 样品与试剂充分混匀。

2. 酶标板放置

• 检查底部是否清洁无液滴。

• 按板托方向指示正确放置，避免反向。

3. 测量步骤

1. 打开软件并加载方法文件。

2. 将酶标板放入板托，关闭板托门。

3. 点击“开始”运行测量。

4. 检测完成后检查数据，必要时重复测量。

六、注意事项

1. 预热时间不足会导致光源输出不稳定，影响数据准确性。

2. 样品加液不均匀、出现气泡会造成孔间差异增大。

3. 酶标板底部污渍会导致光路阻挡，应及时清洁。

4. 在测量过程中不要打开板托门或移动仪器。

5. 双波长模式下，参考波长应选择不被显色物质吸收的波长。

七、常见错误与排查方法

1. 数据偏低或偏高

• 检查光源是否老化。

• 确认滤光片是否损坏或污染。

2. 孔间差异大

• 检查加液操作是否一致。

• 检查板托定位精度。

3. 软件无法连接仪器

• 检查通讯线连接。

• 重启设备与软件。

4. 波长读取异常

• 执行光路校准，必要时更换滤光片。

八、维护与保养培训

1. 日常维护

• 使用后清洁板托和外部表面。

• 不使用时盖上防尘罩。

2. 定期维护

• 每季度执行一次光路清洁和校准。

• 每半年检查滤光片和光源状态。

3. 长期停用维护

• 清洁设备并存放于干燥环境。

• 断开电源并覆盖防尘罩。

九、培训考核建议

为了确保培训效果，可以在培训结束后进行操作考核：

1. 理论测试：考察学员对设备结构、原理、软件功能的理解。

2. 实际操作：要求学员独立完成一次标准 ELISA 测试，包括方法设置、数据读取和导出。

3. 故障排查：模拟常见错误，考察学员的应对能力。

十、结语

赛默飞 Multiskan Ascent 酶标仪的正确操作不仅关系到实验结果的准确性，也直接影响设备寿命。通过系统的操作培训，操作者能够快速上手并养成良好的实验习惯，减少因操作不当导致的误差与故障。实验室应将操作培训纳入新员工入职流程，并定期组织复训，以确保每位操作者都能在最佳状态下使用设备。