赛默飞酶标仪 Multiskan Ascent 操作规程

一、适用范围

本规程适用于 Thermo Scientific Multiskan Ascent 酶标仪的日常操作、检测任务执行与基本维护管理，确保仪器运行稳定、数据准确、使用安全。适用于比色类吸光度分析实验，如ELISA、蛋白浓度测定、酶活性分析、细胞增殖毒性检测等。

二、仪器简介

Multiskan Ascent 是一款经典的分光光度型酶标仪，采用高精度比色检测原理，支持单波长、双波长及多波长扫描。设备内置最多8位干涉滤光片插槽，兼容标准96孔微孔板，配备自动滑动式托盘与稳定光学系统，通过配套 Ascent 软件控制操作与数据采集，具备终点法、动力学法、参考波长校正等多种功能。

三、操作人员要求

• 必须经过专业培训，熟悉ELISA或比色类实验原理；

• 能熟练掌握微量加样、孔板操作等实验技巧；

• 熟悉Windows系统及数据处理软件基本操作；

• 禁止未经授权的人员独立操作仪器。

四、使用前准备

1. 环境要求

• 室温保持在15–30℃，相对湿度不超过70%；

• 工作台应平整、稳固、干燥，避免阳光直射与震动干扰；

• 周围不应堆放强磁场或电源干扰设备。

2. 电源检查

• 使用220V交流电源，电源插座需接地良好；

• 检查电源线插头、保险丝是否完好，确保电源稳定。

3. 连接与开机

• 将酶标仪主机与计算机通过USB或RS232接口连接；

• 打开仪器背部电源开关；

• 启动配套控制软件（Ascent），确认设备状态为“Ready”。

4. 滤光片确认

• 检查并确认需要使用的滤光片是否已正确安装；

• 波长配置应与检测项目匹配（如TMB底物检测使用450 nm）；

• 进入“滤光片配置”菜单，设定每个插槽对应的波长信息。

五、样品准备与孔板装载

1. 使用符合规格的96孔标准透明平底板；

2. 每孔加样体积建议为100 μL（保证检测深度）；

3. 加样应均匀、准确、避免交叉污染；

4. 孔板表面如有气泡，可用移液器轻吹或离心处理；

5. 完成终止液加样后，尽快进行读板操作。

六、操作流程

步骤一：创建检测方法模板

在 Ascent 软件主界面执行以下设置：

• 新建检测程序；

• 设定检测模式：选择终点法、动力学法或双波长法；

• 设定波长：选择主波长（如450 nm），可启用参考波长（如630 nm）；

• 设定读取孔位：设定读取范围（如A1–H12），指定空白孔；

• 设定读取方式：选择读取顺序（如逐行、Z型），是否重复读取并取平均；

• 保存方法模板：命名保存为“.asp”格式以供重复调用。

步骤二：孔板装载

• 点击软件“Read Plate”按钮，仪器托盘自动弹出；

• 将加好样的微孔板放置于托盘中央位置，注意孔板方向一致（A1在左上角）；

• 合上托盘，准备开始检测。

步骤三：启动检测

• 点击“Start”或“Read”开始读板；

• 仪器根据设定波长和孔位顺序依次读取OD值；

• 软件界面实时显示各孔OD数值，可生成热图。

步骤四：数据处理与输出

• 选择是否执行空白扣除、双波长差值运算；

• 可手动录入标准样品OD值与浓度，软件自动生成标准曲线；

• 软件自动计算样品浓度、阳性/阴性判断；

• 点击“Export”导出Excel、CSV或PDF格式结果报告；

• 保存结果项目文件用于数据追溯。

七、检测模式说明

八、运行注意事项

• 孔板放置方向需统一（A1为左上）；

• 保证孔板干净平整，底部无污迹、裂纹或弯曲；

• 滤光片不得随意插拔，操作时需断电并戴手套；

• 每次使用完毕应及时导出并备份数据；

• 不可随意关闭软件或拔除通讯线；

• 软件未提示“检测完成”前不得强制退出。

九、常见问题与排查方法

十、使用后处理与日常保养

1. 操作完成后

• 拔出孔板，清洁托盘表面；

• 保存实验数据，关闭软件与仪器；

• 切断电源，盖好防尘罩。

2. 每日维护

• 擦拭设备表面与显示屏；

• 清理托盘及检测窗口；

• 检查滤光片是否松动或污染。

3. 每周检查

• 检测空白孔OD值是否稳定（漂移＜0.01 OD）；

• 检查托盘进出是否顺畅，轨道是否卡滞；

• 使用标准溶液检测重复性。

4. 每季度维护

• 校验灯源输出稳定性；

• 清洁所有滤光片表面；

• 升级软件及驱动程序（如有更新）。

十一、安全事项

• 操作前务必确保电源稳定、接地良好；

• 更换灯泡、滤光片需断电进行，避免光源灼伤；

• 不得用酒精直接喷洒仪器内部或光学部件；

• 若发生液体泄漏，立即切断电源并用干布擦拭；

• 非技术人员不得自行拆解设备。

十二、附录

1. 推荐滤光片配置表

2. 使用流程图（建议张贴在仪器旁）

1. 开机 → 启动软件

2. 加样 → 检查孔板 → 放入托盘

3. 设置方法 → 选择波长与孔位

4. 启动读取 → 查看结果

5. 数据导出 → 存档保存

6. 清洁仪器 → 关闭电源

十三、总结

Multiskan Ascent 是一款操作便捷、性能稳定、功能丰富的酶标检测平台。通过标准化操作规程的执行，不仅可显著提高实验数据准确性、重复性，也有助于延长设备寿命、降低故障风险。建议实验室配套使用本规程并结合项目需求细化子流程，纳入质控体系日常管理范畴。