一、设备概述

赛默飞（Thermo Scientific）Multiskan EX 酶标仪是一款基于光学吸收原理的检测设备，主要用于 ELISA、细胞活性检测、酶动力学研究及其他比色法分析。其核心功能是通过特定波长光照射样品并检测透射光强度，从而计算样品吸光度（OD 值）。

为了确保检测结果的准确性与可重复性，正确设置和管理参数至关重要。不同实验需求可能需要不同的波长、测量模式、读取速度等，因此操作者必须了解每个参数的含义与适用场景。

二、参数类型总览

Multiskan EX 的主要参数可分为以下几类：

1. 波长相关参数

• 检测波长选择

• 多波长读取模式

2. 测量模式与读取方式

• 单点读取

• 多点读取

• 动态检测

3. 读板范围与孔位选择

• 全板读取

• 部分区域读取

4. 读取速度与灵敏度

5. 背景校正与参比孔设置

6. 温度控制参数（如配套温控模块时）

7. 数据处理相关参数

• 吸光度范围

• 数据输出单位与小数位

• 自动计算功能（如空白扣除、标准曲线拟合）

三、参数设置前准备

1. 实验需求分析

• 明确实验类型（如终点法 ELISA、动力学检测、双波长法等）。

• 根据实验方案确定所需波长、读取模式及板孔布局。

2. 硬件检查

• 确认滤光片安装位置及数量。

• 检查光源状态，确保亮度稳定无闪烁。

• 对二手设备，建议在首次使用前完成光路和波长校准。

3. 软件/面板准备

• 确认仪器与控制软件连接正常。

• 清除旧的参数设置，防止误用。

四、各项参数详细说明

1. 波长设置

• Multiskan EX 配备多组滤光片（常见 405 nm、450 nm、492 nm、620 nm 等）。

• 单波长模式：适合常规终点法检测。

• 双波长模式：常用于 ELISA，主波长用于检测信号，参比波长用于扣除背景噪声。

• 多波长模式：可同时测量多个波长，用于多指标检测或光谱扫描。

2. 测量模式

• 单点读取：对每个孔的中心位置进行一次测量，适合液面高度均匀的样品。

• 多点读取：在每个孔的不同位置读取多次并取平均值，适用于液面不平整或需要提高精度的情况。

• 动力学模式：设定时间间隔连续读取样品吸光度，监测反应过程变化。

3. 读板范围

• 全板读取（96 孔）：用于大规模样品检测。

• 部分区域读取：可选择部分行/列或单独孔位，适合小批量检测或重复测量。

4. 读取速度

• 快速模式：适合信号稳定性高的样品。

• 标准模式：平衡速度与精度。

• 慢速模式：提高信号采集精度，适合弱信号或反应速度慢的实验。

5. 背景校正

• 选择空白孔作为参考，自动扣除环境光与系统噪声的影响。

• 参比孔位置应代表全板背景水平。

6. 温控参数（如适配温控模块）

• 设定恒温范围（通常 25℃–37℃）。

• 温度稳定时间应与实验方案匹配。

7. 数据处理与输出

• 吸光度显示范围（通常 0.000–4.000 OD）。

• 选择保留小数位数（一般 3 位小数）。

• 自动计算功能包括空白扣除、标准曲线拟合、样品浓度计算等。

五、常用实验参数配置实例

1. ELISA 终点法

• 主波长：450 nm

• 参比波长：620 nm

• 读取模式：单点读取

• 读取速度：标准

• 背景校正：空白孔扣除

2. 酶动力学检测

• 波长：405 nm

• 读取模式：动力学

• 读取间隔：30 秒

• 总测量时间：10 分钟

• 数据输出：吸光度变化曲线及斜率计算

3. 双波长快速筛查

• 主波长：492 nm

• 参比波长：620 nm

• 读取模式：多点读取

• 读取速度：快速

• 背景校正：自动

六、二手设备参数校准建议

1. 波长校准

• 使用标准滤光片或吸收标准液体确认波长准确性。

2. 光路校准

• 检查光斑是否居中通过孔位，确保各孔信号一致性。

3. 灵敏度验证

• 使用已知 OD 值的标准板进行比对。

4. 软件参数恢复

• 将软件或面板参数恢复到出厂状态，重新设定实验所需参数。

七、常见设置错误与排查

1. 波长选择错误

• 现象：信号值偏低或不稳定。

• 解决：确认实验方案所需波长并更换滤光片。

2. 读取速度不合适

• 现象：动力学实验曲线噪声大或终点法波动大。

• 解决：根据样品特性调整读取速度。

3. 背景扣除设置错误

• 现象：计算结果异常或负值过多。

• 解决：重新选择代表性空白孔作为背景孔。

4. 部分孔位无数据

• 现象：结果表格显示空白。

• 解决：检查读板范围设置及酶标板放置位置。

八、日常使用建议

1. 设定前先检查滤光片与光源状态。

2. 建立常用实验的参数模板，减少重复输入错误。

3. 对不同类型实验使用不同的文件命名规则和保存路径，方便溯源。

4. 定期备份参数设置文件和实验数据。

九、总结

赛默飞 Multiskan EX 酶标仪的参数设置直接决定了检测结果的准确性和稳定性。熟悉各类参数的含义、适用条件及注意事项，可以帮助操作者快速、准确地完成实验配置，减少人为误差。
对于二手设备，建议在首次使用前进行波长、光路和灵敏度的全面校准，并建立适合实验室常用方法的参数模板，以确保长期的重复性和可靠性。