赛默飞酶标仪Multiskan EX操作规程

一、目的

为规范实验室对赛默飞Multiskan EX酶标仪的操作流程，确保检测数据的准确性、设备运行的安全性与稳定性，特制定本规程。适用于本仪器在吸光度法检测（如ELISA、蛋白定量、酶活分析等）中的标准操作流程。

二、适用范围

本规程适用于Thermo Fisher Scientific生产的Multiskan EX型酶标仪的常规使用操作，包括：

• 酶联免疫吸附实验（ELISA）；

• 酶活性分析；

• 细胞活性、毒性检测；

• 吸光度读取（单波长或双波长）等相关实验。

三、设备简介

Multiskan EX为自动多通道酶标检测设备，具备以下技术特点：

• 光源系统：钨灯或LED光源，寿命长、光强稳定；

• 波长范围：340–850 nm（支持单/多波长读取）；

• 板型支持：96孔板（标准）；

• 检测速度：通常96孔约需10–30秒；

• 数据接口：串口或USB连接至电脑；

• 控制软件：Ascent for Multiskan EX。

四、操作人员要求

• 应由经过专业培训的实验人员操作；

• 熟悉本规程并掌握仪器使用、安全及基础故障排除知识；

• 应有一定实验设计与数据分析能力；

• 熟练操作Ascent软件及办公自动化软件（如Excel）。

五、操作前准备

1. 检查仪器环境

• 放置于干燥、无阳光直射、通风良好处；

• 环境温度建议控制在18–28°C，湿度低于70%；

• 避免靠近强电磁源、高温设备或振动源。

2. 检查电源与气源

• 插座电压为220V，接地良好；

• 确保电源线、接口、转换线无破损或松动；

• 打开后端电源开关，设备处于待机状态。

3. 启动电脑与软件

• 打开控制电脑；

• 启动Ascent软件，确认设备已被识别；

• 检查波长设置与板型参数是否默认正确。

4. 样本准备与板位核查

• 使用96孔酶标板，样本装量一致，避免气泡；

• 若需设标准孔、空白孔、阴阳性对照，应提前设计好孔位图；

• 板底无污染、无液滴，保持干净干燥。

六、标准操作流程

步骤一：设置实验参数

在Ascent软件中进行如下操作：

1. 点击“New Protocol”创建新实验；

2. 设置“Wavelength”，选择目标波长（如450 nm）；

3. 若需参比波长，勾选“双波长”并设定辅助波长（如620 nm）；

4. 选择读板方式（全板/部分孔）；

5. 配置孔位分组、分析方法（吸光度、标准曲线、平均值等）；

6. 命名文件名与保存路径，设置导出格式（如Excel、CSV）。

步骤二：插入酶标板

1. 打开托盘按钮（软件或面板控制）；

2. 将96孔板放入托盘，注意方向正确；

3. 确保板紧贴托盘边框，无晃动、倾斜；

4. 合上托盘。

步骤三：开始读取

1. 点击“Start”或“Read”按钮；

2. 设备自动读取所有孔光密度值；

3. 软件窗口实时显示结果，读取时间约为10–30秒；

4. 读取完成后，酶标板自动弹出。

步骤四：数据处理

1. 软件根据设定进行平均、标准差、校准、浓度换算等计算；

2. 可在软件中生成结果报表、标准曲线图、可视化图形；

3. 如需重新分析，可点击“Recalculate”修改分析条件。

步骤五：导出与保存

1. 点击“Export”导出数据；

2. 选择保存格式：Excel（.xls）、CSV、TXT、PDF等；

3. 命名文件并保存至指定文件夹；

4. 建议同时截图保存参数配置页面用于实验备案。

七、实验结束后操作

1. 退出软件程序，关闭电脑；

2. 关闭酶标仪电源开关；

3. 擦拭外壳和托盘，保持干净干燥；

4. 拔除USB或串口连接线，防止老化；

5. 盖上防尘罩，避免灰尘污染内部光学系统；

6. 做好数据备份与实验记录登记。

八、安全注意事项

• 严禁液体直接接触仪器，避免腐蚀或短路；

• 酶标板孔内不可超量加样，防止溢出污染光路；

• 操作时手部应干燥，避免触电；

• 禁止在设备运行时强行关闭电源或拔线；

• 使用期间如发现异常响声、闪屏、无响应，应立即断电并通知负责人；

• 操作电脑应安装正版防病毒软件，防止系统故障影响数据采集。

九、常见问题处理

十、使用管理与记录要求

1. 实验人员应建立“仪器使用登记表”，每次使用应记录使用人、时间、项目名称；

2. 维护人员每月进行维护记录（见《Multiskan EX维护方法》文档）；

3. 所有导出数据应存入共享服务器或实验室数据库；

4. 软件协议模板建议统一编号管理，防止误删或误改；

5. 每年进行一次使用情况统计，用于设备利用率分析与评估。

十一、附：应急处理流程图（文字简化版）

1. 问题发生 → 停止实验 → 断电/退出软件

2. 问题类型判断
     - 设备层面 → 检查硬件或联系维修
     - 软件层面 → 重启程序/更新驱动
     - 操作误差 → 重新设定参数或重新加载板

3. 处理后记录问题 → 写入故障登记表

4. 检测确认无误后继续实验

十二、结语

Multiskan EX作为酶标检测中高频使用的关键设备，其操作规程不仅关系到设备运行本身，更直接影响到实验数据的准确性与可重复性。熟练掌握仪器操作规范，是每一位实验人员的基本技能要求。

本操作规程应作为实验室标准制度文件进行张贴或印发使用。同时，建议结合仪器维护规程与年度培训计划，系统建立实验室酶标仪使用管理体系，实现设备使用的安全化、流程化、高效化目标。