一、设备简介

赛默飞（Thermo Scientific）Multiskan Ascent 酶标仪是一款基于光吸收法（Absorbance）的多功能微孔板检测设备，常用于 ELISA 检测、酶动力学分析、蛋白定量、细胞活性测定等实验。
该设备支持多波长检测、动力学测量、自动化数据处理，并可通过专用软件实现参数设置与结果导出。

二、操作前准备

1. 环境条件检查

• 温度：15–30℃（理想 20–25℃）

• 相对湿度：30–70%RH，无凝露

• 避免阳光直射、强风、震动源及腐蚀性气体

2. 电源与接地

• 使用与铭牌一致的电源电压（常为 AC 220V/50Hz 或 AC 110V/60Hz）

• 三孔插座良好接地，接地电阻 < 4 Ω

• 建议配备 UPS 稳压电源

3. 设备检查

• 外观完好，按键、显示屏、托盘正常

• 光学窗口及滤光片无污渍或划痕

• 电缆连接稳固，无松动

4. 试剂与样品准备

• 按实验方案配置试剂和样品

• 确保加样体积一致、避免气泡、液面高度均匀

三、开机与初始化

1. 连接电源

• 插好电源线，确认接地良好

2. 开机

• 按下电源键，设备自检并进入待机模式

3. 软件启动

• 打开上位机软件（如 Ascent Software），等待设备连接完成

4. 波长与滤光片检查

• 在软件中查看可用波长范围，确认滤光片状态正常

四、参数设置

1. 板型选择

• 选择与实际使用酶标板相符的孔数（96 孔、384 孔等）

• 确认板型布局与实验方案一致

2. 波长设置

• 终点法常用 450 nm 主波长，620–630 nm 参比波长

• 蛋白定量可选 562 nm（BCA 法）、595 nm（考马斯亮蓝法）等

3. 检测模式

• 终点法（End-point）：单次读取所有孔的吸光度

• 动力学法（Kinetic）：多次读取同一孔，分析反应速率

• 多波长扫描（Multi-wavelength）：适合多组分分析

4. 背景校正

• 选择空白孔作为背景扣除基准

• 对高浊度样品建议开启双波长扣除模式

5. 读取范围

• 全板读取：适合大批量样品

• 局部读取：用于重复验证或小批量实验

6. 温控设置（如有温控模块）

• 设置反应温度（常为 25–37℃）

• 预热至稳定后再开始测量

五、实验操作流程

1. 加样

• 按实验方案将样品、试剂加入各孔

• 避免气泡进入，必要时轻拍板底消除气泡

2. 放置酶标板

• 打开托盘，将酶标板放入定位槽

• 保证方向与软件板型设置一致

3. 运行检测

• 点击“Start”或“Run”按钮

• 设备按预设参数依次读取各孔 OD 值

4. 监控运行

• 软件实时显示读取进度

• 发现异常立即暂停并排查原因

六、数据处理

1. 查看原始数据

• 检查空白孔、标准孔、样品孔的 OD 值是否合理

2. 数据计算

• ELISA：根据标准品绘制标准曲线，计算样品浓度

• 动力学实验：分析反应速率曲线

3. 导出数据

• 支持导出为 .xls、.csv 或软件专用格式

4. 归档与保存

• 以实验编号、日期命名文件，并备份至安全位置

七、关机与清洁

1. 取出酶标板

• 按生物安全规范处理板内废液

2. 清洁设备

• 用无尘布擦拭外表及光学窗口

• 避免使用腐蚀性清洁剂

3. 关机

• 关闭软件，按电源键关机

• 长期停用时切断电源并覆盖防尘罩

八、维护保养

1. 日常维护

• 每周擦拭光学窗口，保持清洁

• 每次使用后记录运行状态与环境条件

2. 定期维护

• 每 3–6 个月进行一次光路与波长校准

• 每年进行一次专业检修

3. 耗材更换

• 光源寿命接近时及时更换

• 滤光片表面损伤或镀膜老化时更换

九、常见问题排查

1. OD 值偏低

• 检查波长是否正确

• 检查光源是否老化

2. 部分孔无读数

• 检查板放置方向和定位是否正确

• 检查光路是否被遮挡

3. 重复性差

• 检查加样一致性

• 检查读取模式和背景校正设置

4. 软件无法连接设备

• 检查通讯线连接

• 重启设备与软件

十、二手设备使用注意

1. 首次使用前

• 完成光路、波长、灵敏度校准

• 检查光源与滤光片状况

2. 运行初期

• 连续多次使用标准板验证精度与重复性

3. 维护建议

• 光学系统和电气部件优先检查

• 老化元件及时更换

十一、总结

Multiskan Ascent 酶标仪的正确使用流程包括前期环境与设备检查 → 参数设置 → 样品加载与运行检测 → 数据处理与归档 → 关机与维护五大环节。严格执行标准化操作不仅能保证检测数据的准确性和稳定性，也能有效延长设备的使用寿命。对于二手设备，初期的性能验证与维护尤为关键，应在正式实验前完成所有校准与检测。