一、样品容量的定义与意义

样品容量 在酶标仪中主要包含两层含义：

1. 一次可放置并检测的样品数量（即检测通量），通常由支持的微孔板规格决定。

2. 单个孔或比色皿中可容纳的样品体积范围（即体积容量），与检测灵敏度、光程和样品消耗量直接相关。

对于 Varioskan Flash 而言，样品容量不仅决定了单次实验可处理的样品数目，还影响检测模式的适用性和数据的可靠性。例如，在高通量药物筛选中，需要一次处理几百到上千个样品；而在分光光度法核酸定量时，则可能更关注小体积高精度测量。

二、支持的样品承载形式

1. 微孔板类型

Varioskan Flash 支持多种规格的标准微孔板：

• 96 孔板（最常见，孔容量通常为 200–350 µL）

• 384 孔板（适用于高通量筛选，孔容量约为 20–120 µL）

• 其他板型（部分型号支持 24 孔、48 孔、1536 孔等特殊板型，需结合托架适配器）

这种多板型兼容性，使得用户可以根据实验规模和样品成本选择最合适的容量配置。

2. 比色皿模式

• 支持标准光程（1 cm）石英或塑料比色皿

• 单次测量样品容量通常在 1–3 mL

• 适合蛋白质浓度测定、核酸定量、酶活性分析等需要大体积、长光程的实验

3. 微量样品检测

• 配合低体积专用板（Low-volume plate）或 Nano 容量插入件，可在 2–10 µL 体积范围内完成测量

• 适用于珍贵样品（如稀有蛋白、临床样本）的检测，节省试剂与样品用量

三、样品容量范围

1. 孔板容量范围

*1536 孔板检测需要特定光学配置和托架，不是所有 Varioskan Flash 标配功能。

2. 比色皿容量范围

• 常规比色皿：1–3 mL

• 微量比色皿：50–200 µL（缩短光程以适应小体积）

四、不同检测模式下的容量特性

Varioskan Flash 具备多种检测模式，不同模式下对样品容量的要求与表现差异显著：

1. 吸光度检测

• 对光程依赖明显，样品容量需覆盖光束路径

• 在 96 孔板中通常 ≥ 200 µL 可达到标准光程（约 0.5–0.6 cm）

• 低体积检测需通过光程修正公式进行计算

2. 荧光检测

• 对光程要求不高，信号强度与样品体积关系主要取决于光束覆盖面积与激发效率

• 小体积检测可显著节省荧光染料，但过低体积可能增加蒸发影响

3. 化学发光检测

• 对体积要求灵活，信号主要受反应体系浓度影响

• 小体积有助于提高反应物浓度，从而增强信号

五、影响样品容量利用的因素

1. 板型与孔形设计

• U 型孔、V 型孔、平底孔的容量和光学性能差异明显

• 平底孔更适合吸光度检测，V 型孔更适合回收样品或聚集沉淀

2. 样品粘度与表面张力

• 高粘度样品可能导致液面不均，影响光学路径

• 表面张力差异大时需控制加样速度以减少气泡产生

3. 蒸发与温度控制

• 长时间检测中，特别是在高温条件下，小体积样品蒸发会影响浓度和信号

• 可使用防蒸发盖或在边缘孔填充缓冲液

六、典型应用与样品容量选择

1. ELISA 检测

• 常用 96 孔板，200–300 µL 容量

• 需确保液面覆盖孔底光路，防止信号不均

2. 荧光定量 PCR 终点检测

• 可使用低体积 384 孔板（20–50 µL）

• 节省试剂，提高反应密度

3. 药物筛选

• 384 孔板甚至 1536 孔板，样品体积可低至 2–10 µL

• 配合自动化加样系统实现高通量

4. 蛋白浓度测定（Bradford/BCA）

• 比色皿模式（1–3 mL）或 96 孔板模式（≥ 200 µL）均可

• 大体积比色皿适合高灵敏度检测

七、容量优化策略

1. 根据检测模式选择合适孔板

• 吸光度检测选平底板，荧光检测可用黑色板减少背景

2. 尽量使用低体积高灵敏度模式

• 减少试剂和样品消耗，尤其适合珍贵样本

3. 边缘效应控制

• 在边缘孔加入缓冲液，减少温差与蒸发造成的信号漂移

4. 自动化精密加样

• 提高加样一致性，避免体积误差引起数据偏差

八、维护与注意事项

• 定期清洁样品托架，防止溢液污染光学系统

• 避免使用超过额定容量的样品体积，以防溢出

• 使用合适的板盖或密封膜减少蒸发

• 在高灵敏检测模式下，保证样品容量与光路匹配，减少误差

九、总结

赛默飞 Varioskan Flash 酶标仪在样品容量方面提供了极高的灵活性，既能满足大体积比色皿的高精度检测，也能支持低至 2–10 µL 的微量高通量分析。其兼容多种板型与检测模式，使用户能够在不同实验目标下自由选择容量配置，最大化检测效率与数据质量。

在实际应用中，合理利用样品容量需要结合检测模式、板型特性、样品性质与实验时长等多种因素综合考虑。通过科学的容量管理与优化，可以显著提高实验的通量、降低成本，并确保检测结果的准确性与可重复性。