一、设备概述

赛默飞（Thermo Scientific）Multiskan EX 酶标仪是一款经典的全自动酶标检测设备，主要用于 ELISA、细胞活性检测、酶动力学分析等实验。其核心检测系统为光学测量模块，通过精确的光路设计实现对样品光吸收度（OD 值）的测量。

光路校准是保证测量准确性和重复性的关键步骤，尤其对于长期使用的设备和二手设备来说，定期校准更是必不可少。

二、光路系统原理

1. 光源

• Multiskan EX 采用卤素灯或氙灯作为光源，提供稳定、宽谱的光信号。

• 光源通过滤光片选定特定波长（常用 405 nm、450 nm、492 nm、620 nm 等），以适配不同检测方法。

2. 滤光片与波长选择

• 设备配备可更换或旋转式滤光片组，通过机械定位实现波长切换。

• 滤光片确保光束单色性，提高检测灵敏度。

3. 样品透射路径

• 光束经过准直后穿过酶标板中每个孔的样品溶液。

• 样品对光的吸收与其浓度成正比（符合 Lambert–Beer 定律）。

4. 光电检测器

• 透过样品的光被光电二极管或光电倍增管接收，转换成电信号。

• 信号经过放大、模数转换后进入计算模块，最终得到 OD 值。

三、光路校准的目的与必要性

1. 保证测量精度

• 光路偏移会导致光斑未完全穿过样品孔，造成信号丢失或误差。

2. 确保波长准确

• 滤光片与光路不对准会导致中心波长偏差，影响吸光度测量的准确性。

3. 提高重复性

• 校准后的光路能确保不同批次、不同位置的样品测量结果一致。

4. 延长设备寿命

• 定期校准可提前发现光源衰减、滤光片磨损、机械定位偏差等问题。

四、校准前的准备工作

1. 环境条件

• 在稳定、无强烈振动的实验台上进行。

• 避免阳光直射和强环境光干扰。

2. 设备状态检查

• 确认电源正常、显示屏与按键功能正常。

• 检查光源寿命指示，如接近寿命上限建议先更换。

3. 校准工具与耗材

• 原厂光路校准板（通常为标准空白板或带特定光学性能的参考板）。

• 校准软件或设备内置的光路调整模式。

• 清洁棉签和无尘布，用于擦拭光路窗口。

五、光路校准步骤

步骤 1：进入校准模式

• 打开设备电源，进入主菜单。

• 选择“光路校准”或“Maintenance（维护）”功能。

步骤 2：安装校准板

• 将标准校准板放入酶标板载台，确保定位准确、无倾斜。

• 注意不要触摸板底，防止污染或划伤透光区域。

步骤 3：初始扫描

• 启动一次全板扫描，记录当前各孔光信号强度。

• 系统将自动分析信号一致性与偏移量。

步骤 4：机械位置调整

• 如果软件提示光路偏移，需手动或自动调整光源与检测器位置。

• 手动调整时，松开固定螺丝，微调光路组件，再锁紧。

步骤 5：重复验证

• 再次扫描校准板，比较新旧信号差异。

• 确保各孔信号一致性在允许范围内（通常 CV ≤ 1%）。

步骤 6：保存校准结果

• 在设备中保存新的光路位置数据。

• 完成后退出校准模式。

六、校准注意事项

1. 校准板必须保持清洁透明，无划痕或污渍。

2. 操作过程中避免强光直射到检测窗口。

3. 调整幅度应小，避免一次调整过大导致反向偏移。

4. 二手设备建议在首次使用前进行光路校准，并配合光源更换或滤光片清洁。

七、常见问题与排查

1. 光强不足

• 检查光源是否老化。

• 检查光路是否有灰尘或异物遮挡。

2. 波长误差大

• 可能是滤光片定位不准确或滤光片老化。

3. 各孔信号差异大

• 检查光源与检测器是否对准板孔中心。

• 检查酶标板是否平整放置。

4. 校准失败提示

• 校准板型号错误或表面污染。

• 设备内部光学模块松动。

八、二手设备光路维护建议

1. 使用前全检

• 检查光源亮度、波长准确性和光路清洁度。

2. 定期保养

• 每 3–6 个月进行一次光路校准。

• 每次使用前用无尘布擦拭光路窗口。

3. 配件更换

• 光源使用寿命一般为 2000–3000 小时，衰减明显时需更换。

• 滤光片表面有划痕或镀膜剥落时应更换。

4. 记录档案

• 建立光路校准记录表，记录每次校准时间、结果及调整情况。

九、总结

光路校准是确保赛默飞 Multiskan EX 酶标仪长期稳定运行的核心步骤之一。通过定期校准，不仅能提高测量精度和重复性，还能及时发现光学系统的潜在问题。对于二手设备，光路校准尤为重要，因为它能在使用前恢复设备的检测性能，保障实验数据的可靠性。