一、目的与适用范围
为确保赛默飞3131培养箱在细胞与微生物相关实验中的安全、稳定与可追溯运行，特制定本使用规范。适用于本实验室所有使用该设备进行培养、孵育、温控与气体控制操作的人员，包括临时访问者与新员工。

二、术语与设备构成

1. 工作腔：样品放置与气体交换的有效空间。

2. 控制面板：用于设定与查看温度、CO₂等运行参数的交互界面。

3. 循环风道：完成混气与热量均衡的通道，含送回风部件。

4. 加湿系统：常为水盘或同类结构，用于维持高湿。

5. 传感器组：温度、CO₂及必要时的湿度探头。

6. 二次容器：承接样品的密闭托盘或周转盒，用于防渗与分区管理。

三、角色与职责

1. 设备管理员：维护SOP版本、安排保养、管理备件、审批变更与停用。

2. 使用人：按规范设定参数、正确摆放、完成记录与清洁收尾。

3. 质控专员：按周期执行抽检与稽核，对偏差与污染事件进行追踪闭环。

4. 安全员：监督电气、气瓶与化学品合规，组织应急演练。

四、场地与安装要求

1. 环境：远离强风直吹、热源与强震源，室内粉尘与挥发物控制在实验室标准范围。

2. 间隙：设备背部与侧面保持便于散热与检修的安全距离，顶部不堆放物品。

3. 供电：独立回路、可靠接地，配置浪涌与漏保；条件允许时接入在线UPS。

4. 气源：CO₂等气体使用合规等级与匹配减压器，管路固定牢靠、无折瘪。

五、一般安全与合规

1. 禁止将培养箱作为化学品储柜或烘箱使用。

2. 使用期间保持门体完好闭合，严禁以异物卡门。

3. 与人体有潜在致病风险的样品必须二次容器密闭并设置风险标识。

4. 涉及温度、CO₂设定的重大变更须走变更评估与批准流程。

六、首次启用与搬迁后复核

1. 空箱预运行：按目标设定运行并记录12–24小时稳定性曲线。

2. 均匀性抽检：在上下前后布点记录温度（与CO₂如适用），确认偏差在可接受范围。

3. 门封检查：纸带或烟雾法确认密封连续性与磁力充足。

4. 文档：形成启动报告并归档，方可投入日常使用。

七、每日启用前检查（开机前）

1. 显示与报警：确认无报警、参数显示正常。

2. 水盘与清洁：液位在标线，水质澄清，无可见沉积。

3. 气源压力：压力表处于工作区，接头处无泄漏痕迹。

4. 内腔状态：层板整洁、回风孔与探头无遮挡。

5. 台账：预约与占用信息清晰，避免冲突。

八、参数设定原则

1. 温度：按工艺文件设定；避免频繁大幅调整。

2. CO₂：常用设定如5%为例，首次或更改后观察恢复曲线并记录时间。

3. 湿度：通过加湿系统维持，样品勿置于水盘正上方的高湿冲击区。

4. 限制与锁：设定完成后可启用按键锁或用户权限，防误触。

九、样品与耗材管理

1. 标签：样品名/细胞系、批次或传代、培养基要点、责任人与日期，贴于可见侧缘，不遮挡透气位。

2. 二次容器：承接培养皿与孔板，防止渗漏与滴落。

3. 分区：每层划分固定区位，高风险样品专区并用显著色标区分。

4. 登记：电子台账同步记录层位、区位、样品编号与预计取出时间。

十、正确摆放与装载

1. 覆盖率：单层占用面积建议不超过约70%，保持送回风通道畅通。

2. 间隙：容器与后壁、探头保持合理间距，避免贴靠。

3. 堆叠：多孔板不建议超过两层；同尺寸培养皿错位叠放不超过三层并置于托盘。

4. 重心：大体积或高液量容器置于层板中部，避免偏载与倾覆。

十一、取放操作流程

1. 取放前：在操作台完成分拣与标记，计划路径，减少开门时长。

2. 取放中：按区位一次到位，动作轻稳，避免触碰探头与内壁。

3. 复位：关门后观察参数恢复，若恢复时间明显延长，检查门封、负载与遮挡。

4. 记录：更新台账与操作记录，标注实际取放时间。

十二、气源与加湿系统管理

1. 气瓶轮换：两瓶轮换一瓶备用，低压预警线前完成更换；更换后复检压力与泄漏。

2. 管路与接头：每周检漏一次，年度更换老化软管与密封件。

3. 水盘维护：按周更换加湿水，使用无菌蒸馏水；清洁水盘与导流槽，避免生物膜形成。

4. 冷凝控制：入箱前让样品与培养基预平衡；如玻璃凝露明显，暂停频繁开门。

十三、空气循环与均匀性要点

1. 送风扩散：送风面与回风孔保持洁净无阻，避免形成滞流死角。

2. 围幕效应：开门后尽快合上，依靠前缘气流重建边界层，缩短恢复时间。

3. 均匀性复核：季度或半年度做多点抽检，偏差异常则排查遮挡与负载。

十四、定时与程序化运行（如机型支持）

1. 运行计时：到时提示并保持或转待机，避免无人状态下的剧烈切换。

2. 预约启动：与预热时间配合，保证任务开始时环境已达稳态。

3. 多段程序：温度/CO₂分段切换时加入缓冲，降低过冲与凝露风险。

4. 日志：首次新程序需记录完整曲线，作为后续参考基线。

十五、报警与异常处置

1. 温度或CO₂偏差：先关门稳定，核对门封、负载密度与气源压力；必要时校验传感器。

2. 湿度异常：检查水盘液位、是否直吹水面与开门频率。

3. 异味/污染征兆：立即封存涉事层，移出样品，按污染应急流程深度清洁与验证。

4. 事件单：所有报警均形成记录，注明时间、现象、处理与恢复确认。

十六、清洁与消毒

1. 日清：操作后擦拭残液与水渍，保持层板与门玻璃洁净。

2. 周清：更换加湿水，清洁内壁、回送风孔与密封沟槽。

3. 深度处理：按月或污染事件触发进行高温灭菌或化学消杀；结束后空箱再平衡再投样。

4. 清洁剂选择：使用对材质友好且经验证的清洁与消毒方案，避免氯系腐蚀。

十七、维护保养与校准

1. 传感器：温度与CO₂按周期校准并留存证书；校准后执行一次稳态验证。

2. 结构件：检查层板导轨、门合页与把手，及时紧固与更换磨损件。

3. 风机与过滤（如配备）：评估噪音与振动，按压损与周期更换滤件。

4. 备件：门封条、管路、密封圈、快接头、保险丝等建立最小库存。

十八、记录与追溯

1. 运行台账：包含操作者、设定、层位、样品编号、开始/结束时间、异常与处理。

2. 维护日志：保养、校准、故障维修与备件更换，应记录零件编号与执行人。

3. 数据留存：导出运行与报警日志，按项目或法规要求保留至规定年限。

4. 可视化看板：门外提示卡显示当日管理员、报警联系人与关键注意事项。

十九、变更与偏差管理

1. 变更：涉及设定、部件替换、清洁剂更换的调整须评估风险、批准并小样验证。

2. 偏差：出现未按SOP执行、指标越限或污染事件，需启动调查，形成纠正与预防措施。

3. 复盘：月度汇总偏差与报警数据，形成趋势图，提出改进项并跟踪效果。

二十、培训与胜任力

1. 初训：设备原理、参数设定、分区摆放、清洁收口与应急流程，结业需通过理论与实操考核。

2. 复训：每6–12个月一次，或在偏差/污染后开展专项复训。

3. 授权：通过考核者方可独立操作；关键操作（气瓶更换、灭菌程序）需单独授权。

二十一、常见错误与预防

1. 贴靠后壁：造成回风短路与探头读数失真。预防：保持后部与侧部通道。

2. 过载堆叠：导致均匀性下降与恢复缓慢。预防：遵守覆盖率与层数限制。

3. 频繁开门：引起温湿CO₂剧烈波动。预防：分拣后批量取放。

4. 标签缺失：易误取与追溯困难。预防：入箱前完成标识与登记。

5. 水盘管理不当：滋生异味与生物膜。预防：按周更换、按月深度清洁。

6. 气源耗尽：夜间失败。预防：两瓶轮换与低压预警。

二十二、绩效指标与持续改进

1. 指标库：温度与CO₂恢复时间中位数、报警次数/百机时、污染事件率、计划停机比。

2. 目标值：结合历史P90/P95设定年度改进目标。

3. PDCA：对异常指标制定行动计划，实施后复测并固化为流程或清单。

附录A：日常检查清单（贴门即用）

1. 面板无报警，设定与显示一致。

2. 水盘液位在标线，水质清澈。

3. 送风/回风孔洁净无遮挡，探头可视。

4. 气源压力在绿区，接头无漏气。

5. 层板整洁，装载不超70%，样品有标签。

6. 门封条完好，玻璃无异常凝露。

7. 台账与预约一致，结束任务已签退。

附录B：污染事件快速处置要点

1. 立即封存涉事层位并停止新增样品。

2. 取出样品做适当隔离与评估；必要时采样鉴定。

3. 执行深度清洁或高温灭菌程序。

4. 空箱再平衡与复核，通过后逐步恢复使用。

5. 形成事件报告并开展培训纠偏。

附录C：定期任务时间表（建议）

1. 每日：日检与收口清洁。

2. 每周：水盘更换、管路检漏、门封清洁、随机恢复时间抽测。

3. 每月：深度清洁/灭菌一次（视风险）、传感器偏差核查。

4. 每季度：均匀性抽检、CO₂与温度外置仪校验、数据趋势复盘。

5. 每年：再确认或等效验证、过滤件更换、风机与加热系统健康评估、应急演练。

结语
本规范以“安全、稳定、可追溯”为核心，通过场地与安装、参数设定、样品管理、空气循环维护、气源与湿度管控、报警应对、清洁与校准、记录与培训的全链路要求，确保赛默飞3131培养箱在长期使用中持续提供可重复的培养条件。所有条款应与本单位工艺文件与法规要求相一致，如有冲突，以更严格者执行并完成变更评估与验证。