一、适用范围与职责

1. 适用对象：经培训并通过考核的实验人员。

2. 职责分工：使用者负责日常操作与台账；设备管理员负责维护、校准与故障联络；安全员负责安全审查与应急演练。

二、放置与环境要求

1. 场地：水平坚固台面，背面与侧面留≥10 cm 散热间隙，远离直吹风口、强光、热源与震动源。

2. 环境：室温 18–30 °C，相对湿度 20–80%（无冷凝），洁净整齐，无挥发性腐蚀气体。

3. 接地：独立接地插座，电源规格与铭牌一致，严禁使用劣质拖线板。

4. 气瓶固定：二氧化碳钢瓶或液体 CO₂ 气化装置需牢固固定，配专用减压阀与回火防倒吸装置。

三、介质与耗材

1. 水套：仅用去离子/蒸馏水（电导 ≤10 µS/cm），禁止自来水与含氯消毒水。

2. 湿度盘：同上水质；可酌情加入合规抑藻剂，按说明书浓度执行。

3. CO₂：医用/高纯 CO₂（≥99.5%），出口洁净干燥，稳压后供气。

4. 清洁用剂：70% 乙醇或适配中性清洁剂，禁强酸碱、含氯氧化性药剂直接接触不锈钢内胆与密封件。

四、首次启用（或大修后复位）

1. 外观与附件检查：内胆、门封、搁板、传感器完好；电源线与插头无损。

2. 就位与水平：调平支脚，水平仪校正。

3. 水套加注：按面板/观察窗指示逐步加水至标线，排尽空气，合盖。

4. 气路试压：减压阀一级 0.6–0.8 MPa，二级 0.02–0.05 MPa；检查肥皂水无漏泡。

5. 通电自检：开机后查看自检/报警状态正常。

6. 温度/CO₂ 初校：

• 设定 37.0 °C、CO₂ 5.0%、湿度高。

• 预热稳定 12–24 h。

• 以经校的参考温度计与独立 CO₂ 分析仪复核腔内实测值；如有偏差，按设备菜单进行一次点或偏移校准。

7. 无菌预处理：按机型要求执行高温循环/干热消毒程序或化学擦拭并充分通风干燥。

五、日常开机与运行

1. 开机顺序：电源→自检→确认 CO₂ 气源→设定参数。

2. 运行确认：温度/CO₂/湿度图标进入稳定区后方可放样。

3. 门禁管理：一次取放一批样品，开启时间尽量＜30 s；内门随手关闭，外门轻压到位。

4. 负载原则：搁板均匀摆放，勿遮挡风道与传感器，禁止直接将液体容器置于箱底。

5. 样品标识：容器贴标签含人员、项目、培养基、日期与条件；污染容器严禁入箱。

六、参数设置（常用参考，按项目方案为准）

1. 温度：哺乳动物细胞 37.0 °C；酵母/霉菌等按工艺设定。

2. CO₂：细胞培养常用 5.0%；按培养基缓冲体系调整。

3. 湿度：保持高湿以减小蒸发；定期补水，防干烧。

4. 报警：上/下限建议温度 ±0.5–1.0 °C、CO₂ ±0.5–1.0%（结合工艺容忍度设定）。

5. 恢复策略：频繁开门工况可启用门加热与合适的恢复模式，减少冷凝与温漂。

七、操作流程（标准步骤）

1. 放样前：手消毒→戴手套→擦拭内门把手与接触面→确认参数稳定。

2. 放样：开外门→迅速操作内门→取放样品→先关内门再关外门，确认门封严密。

3. 运行中检查：每班查看温度/CO₂ 指示与报警记录；水位与湿度盘状态；门封完好与是否结露。

4. 取样与补液：在洁净台完成，减少在箱内开启容器操作。

5. 更换气瓶：先关箱体 CO₂ 供气阀→关闭气瓶→更换并按顺序缓慢开启→稳压→检漏。

八、清洁消毒与防污染

1. 日清：擦拭门把手与常接触面；清空积水。

2. 周清：取出搁板与湿度盘，70% 乙醇擦拭内胆、圆角与门封槽；湿度盘清洗晾干后加新水。

3. 月清：检查/更换抑藻剂；清洁风道护罩与传感器附近积尘（勿触碰探头）。

4. 发生污染时：立即封存→移出样品→执行整机高温循环或彻底化学清洁→干燥→重新校准→留样空气沉降或拭子检测合格后复用。

5. 禁止事项：含氯、强氧化剂直接长时间接触不锈钢；硬物刮擦内胆；在箱内开启高挥发性化学试剂。

九、维护与校准（建议周期）

1. 温度与 CO₂ 校准：至少每 6 个月或关键项目前；温度采用经溯源温度计，CO₂ 采用独立红外分析仪/采样法。

2. 门封与铰链：每月检查弹性与密合度，有裂纹立即更换。

3. 传感器与风机：每季度巡检指示是否漂移、噪声异常与积尘。

4. 水套：每 3–6 个月抽排更换，检查腐蚀与水垢。

5. 电气安全：每年一次绝缘与接地测试。

6. 备件：常备门封条、搁板卡扣、保险丝、传感器滤网等。

十、监测与记录

1. 运行台账：包含日期、设定、实测、报警、维护、清洁与异常处置。

2. 验证记录：启动/年度 OQ/PQ，温度均匀性与恢复时间，CO₂ 稳态偏差。

3. 追溯：样品进出箱登记，异常批次标记与隔离。

十一、常见问题与快速排查

1. 温度偏高/低：确认门封、开门频率、负载遮挡；核对环境温度；检查风机运转与加热控制。

2. CO₂ 不稳：查漏（接头、软管）、稳压设定、气瓶余量；执行一次自动/手动 CO₂ 校准。

3. 冷凝/滴水：开启门加热，降低环境湿度波动，缩短开门时间；检查内门密封。

4. 异味/污染：立即停用并彻底清洁消毒；复用前做空气与表面监测。

5. 报警频发：核对报警上下限是否过窄；检查传感器状态与电源电压稳定性。

十二、停机与存放

1. 短停（≤72 h）：清空易挥发与污染风险物，保持基本通电与参数；或按项目要求降至安全设定。

2. 长停（＞72 h）：取出所有样品与水盘→关闭 CO₂ 与电源→放空水套→彻底清洁干燥→门缝留少许缝隙通风→覆盖防尘。

3. 复机：按“首次启用”流程缩减执行，关注校准与无菌状态。

十三、安全与合规

1. 气瓶操作遵守实验室气体安全规范，避免日晒与倒放。

2. 断电/火灾/泄漏应急：立刻断电与关闭气源，按疏散与报告流程执行。

3. 生物安全：按所涉样品等级在生物安全柜内完成开瓶、转移与废弃处理；培养箱仅作恒温恒气体环境，不代替生物安全柜。

十四、绩效指标（可量化管理）

1. 温度均匀性：±0.5–1.0 °C（以腔内多点测试为准）。

2. CO₂ 稳态偏差：±0.5–1.0%（独立仪表月检）。

3. 开门恢复：恢复至设定±容差的时间达标率≥95%。

4. 污染事件：季度目标为零；若发生，完成根因分析与纠正预防。

5. 台账完整率：100%，可追溯至人、时、样与处置。

十五、培训与变更

1. 上岗前完成设备原理、操作、清洁、应急与台账培训并考核通过。

2. 任何参数范围、清洁剂或维护周期的变更需评审、批准与版本化发布。

附：日常简表（张贴于设备旁）
• 开机：电源→气源→设定→稳定→放样
• 放样：手消→快进快出→先内门后外门
• 每班查：温/CO₂ 指示、水位、门封、报警
• 每周清：搁板/内胆/湿度盘；补水换水
• 每月检：门封/风机/传感器附近积尘
• 每半年：温度与 CO₂ 校准
• 污染处置：停用→清洁消毒→校准→复核合格再启用