一、样品选择

正确选择和准备样品是获得可靠分光光度计结果的基础。样品的类型、状态及其对光的吸收特性会影响实验结果的准确性。选择样品时需要考虑以下几个方面：

1. 样品的溶解性

在进行分光光度计分析时，样品的溶解性非常重要。某些固体样品需要溶解在溶剂中才能进行分析，因此，选择合适的溶剂至关重要。理想的溶剂应能够完全溶解样品，且不应与样品反应或影响其光吸收特性。例如，对于有机化合物，常使用水、醇或其他极性溶剂进行溶解；而对于不溶性样品，可能需要使用酸、碱或有机溶剂进行溶解。

2. 样品的浓度

分光光度计的测量范围通常是有限的。如果样品浓度过高，可能会导致光信号饱和，无法获得准确的结果；如果浓度过低，则可能导致信号太弱，无法与噪音分离。因此，样品浓度应在仪器的测量范围内，通常需要根据样品类型和要求的测量灵敏度进行调整。

3. 样品的稳定性

有些样品可能在测量过程中会发生化学反应、分解或降解，影响测量结果。例如，某些有机化合物在长时间接触空气、热量或紫外线的情况下可能会分解。为确保样品的稳定性，应根据样品的特性选择合适的储存和处理方法。

4. 样品的纯度

分光光度计测量的是样品溶液的吸光度，因此样品的纯度对结果有直接影响。样品中杂质的存在可能会干扰吸光度测量，特别是在波长选择性吸收区域。因此，确保样品的纯度是获得准确结果的前提，必要时需要进行样品的纯化或去杂质处理。

二、溶液制备

溶液制备是样品制备中的关键步骤，通常包括溶剂的选择、浓度的计算以及样品的溶解过程。以下是制备样品溶液时需要遵循的基本步骤和注意事项：

1. 选择合适的溶剂

溶剂的选择应基于样品的溶解性和稳定性。例如，水通常是最常用的溶剂，但对于一些有机物或非极性化合物，可能需要选择有机溶剂（如醇、醚、酮等）。选择的溶剂应与样品的化学性质兼容，并且不应与样品发生反应，避免影响测量结果。

2. 浓度的计算

为了获得准确的吸光度测量结果，样品的浓度必须正确。浓度过高或过低都会影响分光光度计的性能。计算样品浓度时，需要根据样品的摩尔吸光系数（ε）、吸光度（A）和光程长度（l）来确定适当的浓度。通常使用比尔定律（Beer-Lambert Law）来进行计算，公式如下：

$$A=\epsilon \cdot c\cdot l$$

其中，A为吸光度，ε为摩尔吸光系数，c为样品浓度，l为光程长度。

3. 溶解过程

溶解样品时，应使用适量的溶剂，确保样品完全溶解。如果样品不易溶解，可以使用超声波清洗器、加热或搅拌等方法加速溶解过程。然而，应注意控制溶解过程中的温度，以免引起样品降解或反应。

4. 标定溶液

有时为了确保溶液的准确性，可能需要对样品溶液进行标定。标定通常使用已知浓度的标准溶液，通过测量其吸光度，确认样品溶液的浓度是否在预期范围内。

三、样品容器的选择

样品容器的选择对分光光度计的测量结果也有显著影响。合适的样品容器能够减少外部干扰，确保准确测量。以下是选择样品容器时应考虑的几个因素：

1. 容器材质

样品容器通常有玻璃、塑料和石英三种材质。玻璃容器适用于大多数常规样品，但对于紫外光谱分析，玻璃容器可能会吸收紫外光，因此需要使用石英容器。石英容器透明于紫外光谱，因此在进行紫外吸收分析时，石英比玻璃更为合适。塑料容器一般用于非苛刻的应用，但可能会在某些波长范围内产生吸收，因此应谨慎使用。

2. 容器的光程长度

光程长度（通常为1 cm）是影响吸光度的重要因素。分光光度计通常使用标准的1 cm光程容器，但对于不同浓度的样品，可能需要使用不同光程长度的容器。长光程容器适用于浓度较低的样品，而短光程容器适用于浓度较高的样品。选择合适的光程长度可以确保样品的吸光度在仪器的测量范围内。

3. 容器的洁净程度

容器表面如果有污渍、划痕或指纹，可能会影响测量结果。因此，容器在使用前应确保完全洁净，并且在每次使用后及时清洁。清洁容器时，可以使用去离子水、乙醇或专用的清洁剂，避免使用会留下残留物的溶剂。

四、样品测量前的准备

在样品准备完成后，进入实际测量阶段前，仍有一些准备工作需要完成，以确保仪器的正常运行和准确测量：

1. 仪器预热

在进行样品测量之前，最好让分光光度计进行预热。预热过程有助于稳定光源和仪器的电子系统，减少测量误差。通常，仪器预热时间为10-15分钟，具体时间取决于仪器的型号和工作条件。

2. 仪器校准

在进行样品测量之前，需要校准仪器。校准过程中，通常使用空白溶液（通常是溶剂）进行基线测量。将空白溶液放入样品池中，确保仪器的基线是零。随后，进行标准溶液或样品溶液的测量，以确认仪器的准确性。

3. 设置合适的波长

根据样品的吸收特性，设置合适的测量波长。选择合适的波长可以确保最大程度地获得样品的吸光度信息。如果不确定样品的吸收峰，可以进行波长扫描，找到吸收峰位置后，再进行精确测量。

4. 样品的均匀性

确保样品溶液的均匀性。如果溶液中存在沉淀或颗粒，可能会影响光的传输和吸收。可以通过过滤、离心或摇晃溶液来确保样品的均匀性。

五、常见问题及解决方法

在进行样品制备和测量时，可能会遇到一些常见问题，以下是几种常见问题的解决方法：

1. 样品溶解不完全

有些样品可能在溶剂中溶解不完全，导致溶液中有残留物。此时可以尝试加热、使用超声波清洗或更换溶剂，帮助样品完全溶解。

2. 吸光度过高或过低

如果样品的吸光度过高，可能超出了仪器的测量范围。此时可以通过稀释样品来降低吸光度；如果吸光度过低，可能需要增加样品浓度或者选择更敏感的波长进行测量。

3. 结果不稳定

如果测量结果不稳定，可能是由于样品不均匀、容器不洁净或仪器校准不当。应检查溶液的均匀性、清洁容器，并重新校准仪器。

六、总结

赛默飞GENESYS 180分光光度计的样品制备是获得准确、可靠测量结果的关键环节。通过正确选择样品、制备合适的溶液、选择适当的容器、确保仪器校准等一系列步骤，可以大大提高实验的成功率和结果的精度。掌握这些样品制备技巧，不仅能帮助用户获得更精确的测量数据，还能提高实验的效率和可靠性。