质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司。

一、概述

伯乐（Bio-Rad）Gene Pulser Xcell 电穿孔仪是一款高性能、高精度的电穿孔系统，用于将外源DNA、RNA、蛋白质或其他带电分子导入细胞。该设备广泛应用于分子生物学、基因工程、细胞治疗、疫苗开发及基础科研等领域。其核心原理是通过短时高电压脉冲在细胞膜上产生瞬时性可逆孔道，使外源分子跨膜进入细胞内部。

电穿孔的成功不仅取决于设备性能，还依赖于操作的规范性与参数的准确设定。为了确保实验结果的可重复性与安全性，Gene Pulser Xcell 电穿孔仪的操作应遵循严格的标准流程，包括设备检查、样品准备、参数设置、放电操作、数据记录与维护清理。

本文详细介绍该仪器的标准操作步骤、安全规范、常见问题及优化建议，帮助研究人员高效、安全地开展实验。

二、设备组成与功能概述

Gene Pulser Xcell 系统采用模块化设计，包含以下主要部件：

1. 主控单元（Main Unit）：负责参数设定、电压控制、时间记录和波形输出。

2. 电容模块（Capacitance Extender）：调节放电时间与能量密度，适用于不同细胞类型。

3. 脉冲控制模块（Pulse Controller）：用于高电阻或高电压实验，调节电流与时间常数。

4. 电极腔体（Cuvette Chamber）：安置样品电极杯，提供安全的放电环境。

5. 电极杯（Cuvette）：承载细胞悬液与导入分子，常见间距为0.1 cm、0.2 cm和0.4 cm。

6. 显示与控制面板：提供参数显示、电流监控、时间常数反馈及运行状态指示。

系统支持**指数衰减波（Exponential Decay）与方波（Square Wave）**两种脉冲模式，适配原核与真核细胞的不同特性。

三、操作前准备

1. 实验环境要求

• 保持实验台面干燥、整洁、绝缘。

• 周围不得有水源、易燃品或高压设备。

• 环境温度建议控制在18–28°C，相对湿度低于70%。

2. 操作人员要求

• 仅限经过培训、熟悉设备结构与安全规范的人员使用。

• 实验时穿戴防护眼镜、实验服、绝缘手套。

• 不得在设备通电状态下更换电极或接线。

3. 设备自检

启动电源后，系统自动执行自检程序，检查电压模块、电容状态与安全锁装置。若发现异常提示，应立即停止操作并排查。

4. 电极杯检查

• 确保电极杯干燥无水迹；

• 检查电极板是否有腐蚀或沉积物；

• 如有杂质应以无离子水清洗并晾干；

• 禁止重复使用一次性电极杯。

5. 样品准备

样品应经过标准化预处理，包括细胞收集、缓冲液洗涤、DNA/RNA纯化等步骤。所有样品需预冷至4°C，以防止过热。

四、操作流程

1. 启动与初始化

• 接通电源，设备显示面板亮起。

• 确认安全指示灯处于绿色状态。

• 选择合适的放电模式：指数波或方波。

• 设置实验参数：电压、电容、电阻、脉冲时间及次数。

2. 参数设置步骤

在主机控制面板上依次完成以下设定：

设定完成后按“确认”键保存，设备进入待机状态。

3. 装样

• 在无菌冰上混合细胞悬液与外源分子溶液；

• 小心移入电极杯，体积应充满间隙且无气泡；

• 擦拭杯壁，确保外部干燥；

• 插入电极腔体并锁定位置。

4. 放电操作

• 确认操作区无人接触仪器；

• 按下“启动”键，系统开始放电；

• 显示屏实时显示电压峰值与时间常数；

• 放电结束后，设备自动进入安全放电模式；

• 当指示灯由红转绿后，方可取出样品。

5. 样品回收

• 用无菌镊子取出电极杯；

• 将样品立即转移至适宜培养基中修复细胞；

• 哺乳动物细胞可置于37°C培养1小时，细菌或酵母需冰上恢复30分钟再接种。

6. 数据记录

系统自动保存当前实验参数，可在菜单中查看或导出。建议人工记录以下数据：

• 样品编号、细胞类型、DNA量；

• 电压、电容、电阻、时间常数；

• 脉冲波形、次数及间隔；

• 实验结果与观察现象。

五、安全注意事项

1. 电极杯插入前必须确认主机处于待机状态。

2. 禁止在设备通电时接触电极、样品腔或高压端。

3. 每次实验结束后，等待“安全”指示灯亮起方可取样。

4. 若样品溅出或杯体破裂，应立即关闭电源并擦拭残液。

5. 定期检查电源线及接地装置，防止漏电。

6. 使用低离子缓冲液以减少电解和气体生成。

7. 若出现报警或错误代码，应停止操作，按说明书查找原因。

六、不同样品的推荐操作参数

上述参数为经验值，实际应根据细胞状态、载体类型和缓冲条件进行微调。

七、实验结束后的处理

1. 电极杯清洗

• 使用无离子水冲洗电极表面；

• 如有盐析残留，可用稀乙醇擦拭；

• 自然晾干或放入干燥箱保存。

2. 仪器维护

• 关闭电源并拔掉插头；

• 擦拭外壳，防止灰尘堆积；

• 每月运行一次自检程序；

• 每6个月由专业人员进行电压校准。

3. 数据归档

• 将实验参数及结果录入电子表格；

• 记录设备运行时间与维护情况；

• 保存样品编号与导入效果以便后续追踪。

八、优化操作建议

1. 电压与细胞活性平衡

高电压可提高导入效率，但过高会导致细胞死亡率上升。建议逐步升压试验，找到临界值。

2. 缓冲液选择

使用低电导率缓冲液，如10 mM HEPES + 250 mM蔗糖，可减少电解与气泡生成。

3. 温度控制

在低温环境下操作能减少热损伤，尤其适用于哺乳动物细胞。

4. 样品浓度

细胞密度过高会导致电场分布不均；过低则影响导入率。建议维持在10⁷ cells/mL左右。

5. 多脉冲策略

对于难转染细胞，可尝试多脉冲设置，每次间隔≥1秒，让细胞膜充分恢复。

九、常见故障与排除

十、安全测试与设备校准

1. 电气安全检测：每月检查接地电阻及漏电电流。

2. 放电性能检测：使用标准电阻负载，检测电压输出曲线。

3. 时间常数校准：比较系统显示值与外部测量值，偏差不超过±5%。

4. 波形监测：通过示波器验证方波或指数波的完整性。

十一、实验后安全关闭流程

1. 结束所有放电操作后，等待5分钟以确保内部电容完全放电。

2. 按下“电源关闭”键，切断主电源。

3. 拔掉电源线，防止长期待机造成电容老化。

4. 记录实验结束时间与设备状态。

十二、质量保障与售后服务

Gene Pulser Xcell 电穿孔仪在出厂前经过严格的电压稳定性、放电一致性和安全性检测。厂家提供质保3年只换不修服务，确保设备在高强度使用下保持性能稳定。
用户可享受以下售后支持：

• 免费技术指导与操作培训；

• 电路与参数校准服务；

• 故障诊断与整机更换；

• 消耗品与电极配件供应。

十三、总结

伯乐Gene Pulser Xcell 电穿孔仪以其高精度控制、可编程波形和卓越的安全性能，成为电穿孔实验的标准化工具。通过规范的操作流程和合理的参数设置，研究者可以实现高效率、高重复性和低损伤的外源分子导入。

整个操作过程应遵循以下原则：

1. 安全第一：严格防止高压触电与样品泄漏；

2. 精确设定：根据细胞类型调整电压、电容和波形；

3. 数据可追溯：保存实验记录，确保结果可重复；

4. 规范维护：定期清洁、校准和检测设备。

通过科学的操作与持续优化，Gene Pulser Xcell 电穿孔仪能够在基因编辑、疫苗开发、细胞治疗等前沿领域发挥强大作用，为生命科学研究提供可靠的技术支持。

质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司。