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伯乐(Bio-Rad)Gene Pulser Xcell 电穿孔仪是一款用于基因导入、电转化及细胞转染实验的高性能设备。其核心原理是通过高压脉冲瞬时作用于细胞悬液,使细胞膜形成可逆性微孔,从而实现DNA、RNA或蛋白质等分子的导入。该技术具有高效率、低污染和适用范围广的特点,但由于涉及高压瞬时放电与生物样品处理,在操作中必须严格遵守安全规范。
本安全指南旨在帮助科研人员正确使用 Gene Pulser Xcell 电穿孔仪,防止安全事故、设备损坏或实验失败,保障人员、仪器与实验环境的安全。
安全优先原则:所有实验操作以人员安全为首要前提;
预防为主原则:在实验前对风险进行预判并采取防护措施;
规范操作原则:严格遵守操作手册及实验室安全制度;
责任落实原则:明确操作者、监督者及维护人员职责;
持续培训原则:定期开展仪器使用及高压安全培训。
Gene Pulser Xcell 电穿孔仪工作时电压可达数千伏,属于高能量瞬时放电设备。其主要潜在风险包括:
高压电击风险:若未正确接地或误触电极,可能造成严重电击;
电弧与放电风险:样品含盐过高或有气泡,会导致电弧闪击;
热损伤风险:高能脉冲可瞬间升温,导致细胞或操作者烧伤;
机械风险:电穿孔杯破裂、样品喷溅等可能造成意外;
生物风险:涉及基因操作或病原细胞时需防止生物污染。
了解设备的潜在风险,是建立安全防控体系的首要步骤。
电穿孔仪应放置在干燥、通风、无尘的实验环境中;
禁止靠近易燃、易爆、腐蚀性化学品;
环境湿度控制在30%–60%,防止静电与漏电;
电源插座应独立布线,接地电阻不超过4Ω;
桌面应平整稳固,仪器四脚全部着地。
操作人员须经过电穿孔仪安全培训;
穿戴防静电实验服、绝缘手套、防护眼镜;
禁止赤手触摸电极与接线端;
长发应束起,避免触及设备;
操作区域禁止饮食与随意走动。
实验前应进行系统检查,确认设备处于安全状态:
电源线无破损;
接地线连接牢固;
电极接口清洁无盐分;
电穿孔杯无裂痕、水渍或导电液残留;
屏幕显示正常,按键响应灵敏;
Pulse Controller 模块稳固无松动。
仪器必须使用三孔接地插座;
禁止使用延长线或非原厂电缆;
在通电前使用万用表检测地线电阻;
不得在仪器通电时拆装接地线。
确认设备连接正确 → 打开电源 → 启动系统自检;
自检通过后方可加载参数;
实验完成后,关闭电源 → 拔除电缆 → 清理仪器表面;
任何情况下,严禁带电插拔电穿孔杯。
原核细胞实验电压建议不超过2.5 kV;
真核细胞或动物细胞实验电压不超过800 V;
初次实验应从低电压开始逐步优化;
若电压设置错误或显示异常,立即停止操作。
样品必须彻底脱盐,避免含NaCl或KCl溶液;
电穿孔杯液面应平整无气泡;
若出现“啪”声或火花,应立即中止实验并断电;
检查电极有无氧化、样品是否过浓。
依据实验室生物安全等级(BSL)规定:
普通质粒或非致病菌实验可在BSL-1环境中进行;
若涉及基因修饰、病毒载体或哺乳动物细胞,应在BSL-2环境下完成;
禁止在开放环境中操作高风险样品。
所有样品操作在生物安全柜中完成;
使用无菌耗材,操作前后清洁工作台;
废弃电穿孔杯与培养物按生物危害废物处理;
操作结束后使用75%乙醇或次氯酸钠擦拭表面。
电击过程中可能发生液体喷溅,需加装防护罩;
电穿孔后样品移取应缓慢,防止产生气溶胶;
若样品含潜在致病因子,应高压灭菌后再弃置。
电击操作时,操作者双手不得触碰仪器金属部分;
电击区应设置警示标识,禁止他人靠近;
实验过程中若发现电弧或异常噪声,应立即中断;
样品溶液不得超过电穿孔杯刻度线;
电击后必须等待显示屏“Ready”提示灯亮起后方可取杯;
若发生液体溅出,应立即断电并用无水乙醇擦拭;
禁止将仪器与其他高压设备共用插座。
使用无水乙醇或去离子水擦拭电极区;
禁止使用腐蚀性清洁剂;
确保完全干燥后再存放;
若电极有氧化斑,应用软布轻拭,严禁使用金属刷。
电击后剩余液体应立即灭菌;
使用的电穿孔杯若为一次性产品,按生物废物处理;
若为可重复使用杯体,需彻底清洗并高温灭菌后存放。
实验完成后,应详细记录:
操作人员姓名与日期;
实验参数与脉冲条件;
异常现象与处理措施;
仪器运行状态与波形稳定性。
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