伯乐Genepulser Xcell电穿孔仪操作注意事项

质保3年只换不修，厂家长沙实了个验仪器制造有限公司

一、前言

伯乐Genepulser Xcell电穿孔仪是一款高精度的生物电转化设备，主要用于通过瞬时高压脉冲改变细胞膜通透性，使外源DNA、RNA或蛋白质进入细胞，从而实现基因导入或转染。
由于该设备在工作过程中涉及高电压放电与敏感生物样品的处理，因此操作安全与技术规范尤为重要。科学的操作注意事项不仅能保证实验结果的可靠性与可重复性，还能延长设备使用寿命、减少故障风险。
本技术文件将系统介绍在设备操作前、中、后各阶段应遵守的注意事项，供科研人员及实验管理人员参考。

二、操作前注意事项

1. 实验环境要求

为确保电穿孔实验的稳定性，操作环境应符合以下条件：

• 温度控制：实验室温度应保持在18℃–25℃之间，避免极端温度影响电气元件稳定性。

• 湿度要求：相对湿度不超过70%，过高湿度可能导致漏电或电弧放电。

• 电源条件：使用稳定的交流电源（220V ±10%，50Hz），实验台应具备良好接地。

• 防干扰条件：避免与大功率电器（如离心机、电炉）共用电源插座，防止电压波动干扰设备输出。

2. 仪器检查

在每次实验前，应对设备进行以下检查：

• 检查电源线、插头是否完好无损；

• 确认电极杯表面清洁、无盐分结晶或导电残留物；

• 打开设备电源后，确认系统自检通过；

• 检查显示屏显示是否正常，无乱码或闪烁现象；

• 确认电容扩展模块与主机连接稳固。

若发现异常情况（如报警提示、气味或发热），必须停止使用并联系维护人员。

3. 样品准备

• 使用对数生长期的活性细胞，确保细胞状态良好；

• 采用电穿孔专用缓冲液，避免使用含盐培养基；

• 清洗细胞三次以去除多余离子；

• 保持样品温度在4℃–10℃之间，以减少电穿孔热效应；

• 样品中不得含气泡，否则会导致电弧放电。

样品浓度一般控制在10⁸ cells/mL，外源质粒DNA应纯度高、无蛋白及盐分污染。

三、操作中注意事项

1. 电极杯使用规范

• 根据实验需求选择合适的电极间距（0.1 cm、0.2 cm或0.4 cm）；

• 确保电极杯干净无水滴，操作前用无菌蒸馏水冲洗并晾干；

• 加入样品体积一般为0.4–0.8 mL，液体需完全覆盖电极表面；

• 装样后轻轻拍打杯壁排除气泡。

2. 参数设定注意事项

• 电压设定应根据细胞类型选择合理范围：细菌通常为1.5–2.5 kV，哺乳动物细胞为200–600 V；

• 电容设置应与电压匹配，小电容适合快速放电，高电容适合温和能量释放；

• 若使用多脉冲模式，间隔时间应大于样品恢复所需时间，避免连续能量叠加造成细胞破裂；

• 设置完成后应再次核对参数，确保输入无误再执行实验。

3. 放电操作安全

• 放电前，确认电极杯安装到位并盖好安全盖；

• 操作人员在放电过程中不得触碰设备与样品；

• 放电结束后，待指示灯熄灭至少5秒方可取出样品；

• 若出现异常声音或火花，应立即按下“停止”键并关闭电源；

• 避免在放电期间开启或关闭其他实验设备，以免引起电磁干扰。

4. 样品处理细节

• 放电后立即将细胞转入预温培养基中恢复；

• 轻轻混匀，避免机械剪切损伤；

• 恢复时间一般为10–15分钟，之后方可进行筛选或检测操作。

四、操作后注意事项

1. 样品处理

• 所有实验废液应按照生物安全规范处理，不得直接倒入下水道；

• 电极杯用蒸馏水冲洗三次，再用70%乙醇擦拭消毒并晾干；

• 若样品含有危险微生物，应置于专用灭菌容器中高压灭菌后处理。

2. 数据保存与记录

• 每次实验完成后，应记录电压、电容、放电时间常数及电压曲线特征；

• 通过USB接口导出数据保存至指定文件夹；

• 记录实验日期、样品编号及操作人员姓名；

• 若使用自动保存功能，需定期备份以防数据丢失。

3. 设备关闭

• 实验结束后先退出系统界面，再关闭电源；

• 拔下电源线，防止长时间待机造成电子元件老化；

• 用干布擦拭设备表面，保持仪器整洁；

• 加盖防尘罩以防灰尘或潮气侵入。

五、安全防护注意事项

1. 电气安全

• 实验台必须配有独立接地装置；

• 严禁带水操作或在潮湿环境下放电；

• 不得使用损坏的电源线或适配器；

• 如发现电击感，应立即停止操作并切断电源。

2. 生物安全

• 操作前佩戴一次性手套与护目镜；

• 处理高危细胞系时应在生物安全柜内进行；

• 放电后样品容器须及时清洁消毒；

• 禁止在设备附近进食或存放食物。

3. 设备防护

• 禁止自行拆卸设备外壳；

• 不得用有机溶剂擦拭显示屏与按钮；

• 若设备长时间不使用，应存放于干燥处并每月通电一次。

六、实验异常与故障处理注意事项

1. 电弧放电：

• 原因：样品中存在气泡或离子浓度高。

• 处理：更换缓冲液、重新制备样品并确保无气泡。

2. 放电不完全：

• 原因：电容接触不良或电源电压不足。

• 处理：检查插头与电容模块连接，确认电源稳定。

3. 电压曲线不规则：

• 原因：电极污染或电极间距错误。

• 处理：清洁电极，确认所用电极杯型号。

4. 细胞死亡率高：

• 原因：能量过高、电压过大。

• 处理：降低电压或减小电容，缩短脉冲时间。

5. 无放电信号显示：

• 原因：安全盖未关闭或系统自检未通过。

• 处理：重新检查设备状态并复位系统。

七、定期维护注意事项

• 每月进行一次功能测试，确认输出电压稳定；

• 每半年校准一次电容模块与电压输出；

• 检查电极表面是否氧化，如有污渍可用酒精棉轻拭；

• 定期清理风口与散热片，防止灰尘堵塞影响散热性能；

• 若设备长时间未使用，应在使用前进行一次空载试运行。

良好的维护习惯是保证仪器长期高效运行的前提。