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电穿孔技术(Electroporation)是一种高效的物理性外源分子导入方法,利用瞬时高电场作用,使细胞膜产生可逆性微孔,从而实现 DNA、RNA 或蛋白质的导入。该方法在分子生物学、细胞工程、基因编辑、免疫学研究及疫苗开发中应用广泛。
伯乐(Bio-Rad)GenePulser Xcell 电穿孔仪是全球科研实验室广泛使用的高性能电穿孔系统。其核心优势在于精确的参数控制、高度的复现性、安全的电气保护设计及强大的多模式操作功能。本文将从设备结构、主要性能参数、电气特性、应用范围、稳定性指标以及对比分析等多个方面,系统介绍 GenePulser Xcell 的技术性能与应用价值。
GenePulser Xcell 系统是一款模块化高精度电穿孔仪,由主机控制单元、波形控制模块、电容模块、电阻模块、电极槽、安全防护系统及操作显示屏组成。仪器可输出两种主要波形:
指数衰减波(Exponential Decay Wave)——适用于原核生物、酵母、细菌等;
方波(Square Wave)——适用于哺乳动物细胞和植物原生质体。
该系统通过内部闭环反馈电路控制输出,使电压、电容及波形稳定性达到国际实验标准。所有放电参数可实时监控、记录与保存,为实验复现性提供可靠保障。
以下为 GenePulser Xcell 电穿孔仪的核心性能参数汇总与解析。
指数衰减模式:200–2500 V;
方波模式:10–1000 V;
电压调节精度:±1%;
电压上升时间:<10 µs;
稳定性误差:≤0.5%。
高电压输出适用于不同细胞类型的膜通透性控制,且稳定性可确保重复实验的一致性。
电容可调范围:25–3300 µF;
充电时间:≤5 秒;
容差范围:±0.5%;
放电时间常数:0.1–99.9 ms。
电容用于储能并决定脉冲持续时间。GenePulser Xcell 采用高品质薄膜电容组件,耐压性能强、温度漂移小,保证长期运行的稳定性。
可调范围:0–1000 Ω;
分辨率:10 Ω;
功率容限:2 W;
典型使用值:200–400 Ω。
电阻决定电流释放速度及波形衰减特性。通过精确控制电阻值,仪器可针对不同细胞特性调节放电能量,实现最佳转染平衡。
指数衰减波形(Exponential Decay Wave):电压随时间呈指数下降,用于快速放电;
方波波形(Square Wave):电压恒定输出,脉冲时间可调;
波形重复精度:±0.2 ms;
脉冲宽度范围:0.05–99.9 ms;
脉冲次数设置:1–10 次,可间隔 0.1–1 s;
波形监控:内置实时显示系统,可导出数据。
两种波形模式可满足不同类型细胞实验需求,尤其方波模式在哺乳动物细胞中具有更高存活率与导入效率。
| 电极间距 | 适用电压范围 | 典型电场强度(V/cm) | 应用对象 |
|---|---|---|---|
| 0.1 cm | 100–1000 | 1×10⁴–1×10⁵ | 小体积细菌、酵母 |
| 0.2 cm | 500–2500 | 2.5×10⁴–1.25×10⁵ | 原核细胞标准实验 |
| 0.4 cm | 100–1000 | 2.5×10³–2.5×10⁴ | 哺乳动物细胞 |
| 0.8 cm | 50–400 | 625–5000 | 植物原生质体 |
不同电极间距决定电场强度,实验中需根据细胞类型合理选择,以避免电弧放电和细胞损伤。
放电时间范围:0.1–99.9 ms;
能量释放精度:±2%;
脉冲间隔控制范围:0.1–10 s;
多脉冲模式下时间差误差:<1%。
该仪器采用微处理器控制系统,可对能量释放曲线进行实时补偿,防止过冲和电场不均。
推荐样品体积:50–100 µL;
适用电导率范围:0.1–10 mS/cm;
最佳缓冲液:低离子强度介质(如 10% 甘油或专用 electroporation buffer)。
高电导率溶液易引起电弧放电,因此建议使用低盐体系。
显示方式:高清液晶屏(LCD);
操作方式:旋钮+触控按键;
显示内容:电压、电容、电阻、波形曲线、能量输出;
数据存储:可保存 99 组实验参数;
接口类型:USB 输出,可导出实验数据。
直观的界面和可编程操作模式使得用户可以快速调用标准参数,实现实验自动化管理。
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