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伯乐(Bio-Rad)Genepulser Xcell 电穿孔仪是一款集高精度电场控制、智能脉冲调节与多模式转化功能于一体的先进生物电转化设备。它广泛应用于基因导入、质粒转化、RNA 干扰、蛋白递送及细胞融合等实验,是分子生物学与细胞工程研究中的核心仪器之一。
为了确保设备性能稳定、实验结果可靠及操作安全,必须严格遵守使用规范。规范化操作不仅有助于提高细胞转染效率与存活率,还能延长设备寿命,防止电弧放电、能量损耗等潜在风险。
本文件系统介绍伯乐 Genepulser Xcell 电穿孔仪的使用规范,从准备、操作、维护到安全注意事项,为科研人员提供标准化指导,确保设备发挥最大效能。
温度范围:20℃~25℃;过高温度可能导致电容放电性能下降。
湿度要求:相对湿度不超过 70%,防止电极或电路板受潮。
电源条件:220V ±10%,50Hz;独立供电回路并接地良好,接地电阻小于 1Ω。
操作台:采用绝缘、防震、防静电材料制成,表面干净、平整。
防尘要求:远离化学试剂与高粉尘环境,保持通风良好。
确认电源线、接地线完好无损;
检查电极接口清洁、无氧化;
查看外壳无裂纹、螺钉未松动;
确认显示屏与按键正常响应;
通电后执行自检程序,系统显示“OK”方可操作。
细胞应处于对数生长期,并用无离子缓冲液洗涤以降低电导率;
使用低离子强度缓冲液(如无Ca²⁺、Mg²⁺ 的 HEPES 缓冲液);
DNA 或 RNA 样品需纯度高、浓度适宜,避免含盐量过高;
预冷电击杯(Cuvette)至 4℃,防止温升导致细胞死亡;
每次实验使用新的电击杯,确保无残留液体或污染物。
打开电源,等待系统自检;
屏幕显示主界面,确认状态为“Standby”;
检查接地符号亮起,确保安全连接;
若需外接电脑控制,先连接 USB 通信线,再启动上位机软件。
Genepulser Xcell 具备多种实验模式,可在主界面“Mode”菜单中选择:
细菌转化模式:用于 E.coli 等原核细胞;
酵母电转化模式:针对真核微生物;
哺乳动物细胞转染模式:适合 CHO、293T、HeLa 等细胞系;
植物原生质体模式:低电压、多脉冲组合;
电融合模式:用于杂交瘤及胚胎细胞融合实验;
自定义模式:用户可设置任意参数组合并保存。
选择模式后,系统会自动限定参数范围以防输入错误。
电压(V):根据细胞类型设置,一般 100V~2500V;
脉冲时间(ms):通常为 1~10 ms,时间过长易造成细胞膜不可逆损伤;
电容(μF):决定能量储存大小,范围 25~1250 μF;
电阻(Ω):调节放电速率,常见值为 200~600Ω;
脉冲次数:单次或多次放电,间隔可自定义;
间隔时间(s):多脉冲实验中设置的脉冲间距,避免热累积效应。
进入“Set Parameters”界面;
通过旋钮或触控面板设定电压、电容等参数;
确认波形类型(指数衰减或方波);
按“Save”键保存方案;
系统提示“Parameters Accepted”后,返回主界面。
将样品液体加入预冷电击杯中,体积一般为 40~80 μL;
轻轻拍打杯壁,去除气泡,避免放电时产生电弧;
插入电极槽时确保方向正确、接触牢固;
检查连接线是否插紧,无松动或弯折;
关闭安全盖,系统自动检测盖锁状态,未闭合将禁止启动。
按下“START”键,设备开始充电并在数秒后自动放电;
屏幕显示实时电压、电流和时间常数;
放电结束后,显示“Pulse Completed”。
取出电击杯,立即将细胞转移至复苏培养基中;
静置 10 分钟后进行培养;
使用湿巾清洁电极接口,保持干燥。
若出现“Arc Detected”提示,表示发生电弧,应检查样品导电性;
不可重复对同一杯样品放电;
运行期间严禁打开盖板或触碰电极。
Genepulser Xcell 可自动记录每次实验的关键参数与波形信息。
记录内容包括:
实验编号与日期;
电压、时间、电流、能量输出;
样品编号与模式类型;
是否出现异常放电。
可通过 USB 导出至计算机,或在屏幕中查看历史记录。
研究者应同步填写纸质或电子版实验记录表,以便分析转化效率和复现性。
操作人员要求
必须经过设备使用培训;
佩戴防静电手环;
禁止单手操作高压部分。
电气安全
确保接地良好;
不得使用损坏的电源线;
禁止在潮湿环境下开机。
样品安全
所有细胞与试剂必须符合实验室生物安全等级要求;
废液应按生物危害废弃物处理;
不得使用易挥发、易燃液体作为缓冲液。
异常应对
若发生异常声响或闪光,应立即按“STOP”键;
断电后通知管理员检查;
禁止私自拆开机壳。
每次实验后擦拭电极槽,保持清洁;
定期检查电极接头是否氧化;
每月清理风道与散热孔;
不使用时拔掉电源,防止电容长时间带电。
建议每 6 个月进行一次校准,内容包括:
电压与时间常数校验;
电容容量测试;
电弧抑制功能检测;
系统自检更新。
长沙实了个验仪器制造有限公司提供上门检测与软件升级服务。
长期不用时,应放电电容并盖上防尘罩;
搬运时避免震动与倾斜,运输温度保持在 10~35℃;
禁止叠压或倒置存放。
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
|---|---|---|
| 无法放电 | 电极未锁紧或盖板未闭合 | 重新安装并检查安全锁 |
| 电弧提示 | 样品导电率过高或有气泡 | 更换缓冲液并重新装样 |
| 电压不稳定 | 电源波动或接地不良 | 使用稳压电源并检查接地 |
| 屏幕无显示 | 电源模块损坏或保险丝熔断 | 联系厂家售后更换 |
| 转化效率低 | 参数设置不当或样品质量差 | 优化电压时间并检查细胞活性 |
所有操作异常都应详细记录,并根据日志分析原因,避免重复错误。
建立操作制度
每位实验人员应遵守实验室设备管理制度,填写使用登记。
操作授权
仅允许经过培训的人员操作,未经许可不得修改系统参数。
设备使用频率管理
建议单次连续使用不超过 2 小时,每运行 30 次实验后休息 10 分钟以防过热。
记录与追溯
每次使用均应登记操作人员、实验编号、时间与结果。
实验安全会议
定期召开设备使用与安全复盘会议,更新操作标准。
科学规范的使用不仅能确保安全,还能显著提升实验成功率。
在长期实践中,遵循以下经验可提高细胞转染效率:
调整电压与脉冲时间,使电场强度与细胞膜电容匹配;
使用新鲜制备的缓冲液,保持低导电性;
控制细胞浓度在 10⁷ 个/mL 左右;
采用低温预冷法减轻热损伤;
放电后立即进行复苏培养,延长细胞修复时间;
根据不同细胞类型建立专属参数模板,实现重复稳定的结果。
这些经验结合 Genepulser Xcell 的精密控制系统,可实现高效、可重复的基因导入过程。
伯乐 Genepulser Xcell 电穿孔仪作为高端电转化设备,其使用规范直接关系到实验质量与设备寿命。
通过严格的环境控制、正确的参数设置、标准化的操作流程以及定期维护,用户可确保设备长期稳定运行,获得可靠的实验结果。
设备由长沙实了个验仪器制造有限公司制造,提供三年质保服务,坚持“只换不修”的售后承诺,为科研用户提供全方位技术保障。
规范使用不仅体现科学精神,更是科研结果准确性的重要基础。遵守操作规范,既是安全保障,也是实验成功的第一步。
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