一、概述：先把“水镜”说清楚再决定要不要加水
在 IX71 倒置荧光显微镜的日常交流里，“水镜”通常指水浸物镜，也有人把“用于水相样品观察的高倍物镜”统称为水镜。是否需要加水，关键不在显微镜型号，而在物镜的浸液类型：
水浸物镜（Water / W / WI）：需要加水或指定水相浸液，让物镜前端与样品之间形成稳定的“水桥”。
干镜（Dry）：不加水，直接对焦观察。
油镜（Oil）：不加水，应使用浸油。
因此，“水镜要不要加水”的标准答案是：用水浸物镜就要加水，不是水浸就不要加水。弄错浸液会导致画面变差、污染物镜甚至增加霉斑与腐蚀风险。
二、主要特点：水浸的优势与对操作的要求
1）折射率匹配提升分辨率与对比度
水浸物镜依赖水层来减少折射率不匹配，从而降低球差，提高边缘清晰度。对厚样品或高倍观察，这种提升更明显。
2）更适合水相与活细胞样品
细胞培养本身处在水相环境中，水浸更贴近实际介质条件，有助于获得更稳定的成像质量。
3）性能高度依赖“水层是否正确”
水层连续、无气泡、厚度合适时，水浸优势才能发挥；一旦水层断开、蒸发或混入气泡，画面会突然变糊、对焦变漂、亮度下降。
三、操作逻辑清单：怎么判断、怎么加、加到什么程度
1）如何确认你用的是否为水浸物镜
最可靠的方法是看物镜外壳标识与环形文字：常见会出现 W、Water、WI 等字样；同时注意倍率与NA信息。若标有 Oil 则为油浸；标有 Dry 或不标注浸液的一般为干镜。实验室里建议给水浸镜贴明显标签，避免新手把水当油或把油当水。
2）水浸物镜为什么必须加水
水浸物镜的光学设计假设物镜前端与样品之间存在水层。若不加水，相当于让光线在空气中传播，折射条件变了，会出现：
细节变软、分辨率下降
背景增加、对比度降低
高倍对焦困难，焦点“发漂”
所以不加水并不是“还能凑合看”，而是直接偏离了物镜的设计工作条件。
3）正确加水的通用方法（适用于玻底皿/盖玻片等）
加水位置：通常在物镜前端或样品玻璃表面滴加一小滴，使物镜与玻璃之间形成连续水桥。
加水量原则：够形成连续水桥即可，不追求多。过多容易流到载物台、污染镜头侧面或进入机械缝隙。
避免气泡：滴加后观察画面或目视检查，气泡会造成局部模糊或亮斑，必要时重新滴加。
对焦策略：先在低倍定位，再切水浸高倍；靠近样品时动作要慢，防止顶到玻底或挤出水滴形成污染。
4）使用过程中何时需要补水
水会蒸发，尤其在：高倍长时间观察、环境干燥、灯源热量较高时更明显。出现以下现象多提示水层变差：
同一视野逐渐变暗或变糊
需要频繁微调焦距才能保持清晰
画面有时清楚有时突然“断焦”
处理方式一般是：先稍微离开焦面或抬高物镜，在安全距离补加少量水，再回到焦面。
5）哪些情况不该加水（避免把“水镜”理解错）
干镜：加水会弄脏物镜、抬高背景，甚至增加霉斑风险。
油镜：必须用浸油，水无法替代，且会导致严重像差与异常反光。
不确定物镜类型：先确认标识或询问管理员，不要凭经验猜。
6）结束后的清洁与保护
水浸使用后应及时清洁物镜前端，防止水渍干结形成盐痕或留下污染膜。清洁时用合适的镜头纸轻拭，动作要轻，避免划伤镀膜；同时擦干载物台与皿底外侧的水迹，减少腐蚀与霉变环境。
四、应用实例：水浸物镜的典型使用场景
1）活细胞荧光观察
在玻底皿中观察线粒体、细胞骨架、膜标记等荧光信号时，水浸能在高倍下保持较好的清晰度与信噪比，适合短时动态记录。
2）厚样品浅层成像
类器官、组织或较厚样品的表层到浅层区域，水浸在控制像差方面更有优势，能得到更清爽的边缘细节。
3）需要更高分辨率的细节结构观察
当干镜在同倍率下细节不够锐利时，水浸在正确水桥条件下往往能提供更好的结构分辨与对比。
五、总结：一条规则解决“要不要加水”
在 IX71 上，“水镜要不要加水”的判断可以简化为：看物镜标识。标注 Water/W/WI 的水浸物镜必须加水形成水桥；干镜不加；油镜加油不加水。操作上把握三点：水层要连续、尽量无气泡、长时观察注意蒸发补水并及时清洁。做到这些，水浸物镜的优势才能稳定发挥，同时也能避免对物镜和设备造成不必要的污染与损伤。
