荧光定量 PCR(Real-Time Quantitative PCR, qPCR)已经从 20 世纪末的实验室新技术,发展为生命科学和临床检测的常规手段。它将 PCR 扩增与荧光信号检测同步进行,能够在每一循环实时监测反应过程,最终以定量方式输出结果。
罗氏(Roche)的 LightCycler 系列 qPCR 仪在全球拥有广泛的用户基础,以精确的温控、优良的光学系统和直观的操作软件著称。对于预算有限的实验室,二手罗氏 qPCR 仪不仅能显著降低购置成本,还能在性能上满足绝大多数科研与检测需求。特别是 LightCycler 480 II 与 LightCycler 96,二者覆盖了从高通量到中等通量的多种应用场景,是二手市场的热门型号。
罗氏荧光定量 PCR 仪的检测核心,是将荧光信号与核酸扩增过程实时耦合:
扩增
样品中的目标 DNA 或 cDNA 经由 PCR 反应,在热循环系统的温控下按设定的温度曲线扩增。
荧光信号采集
荧光染料或探针在与扩增产物结合或被切割时释放信号,光学检测模块在每一循环结束时进行激发与检测。
曲线生成与分析
软件将信号强度与循环数对应绘制扩增曲线,通过标准曲线法或 ΔΔCt 方法进行绝对或相对定量分析。
检测方式可分为:
染料法(如 SYBR Green):经济、易用,适合基因表达分析。
探针法(如 TaqMan、FRET 探针):特异性高,适合多重检测与临床诊断。
货号:05015278001
通量:可使用 96 孔或 384 孔反应板,满足大规模样本处理需求。
温控:升降温速度快、均一性高,孔间差异极小,确保大通量实验中的一致性。
光学系统:支持多波长检测,可进行多重荧光实验;滤光系统切换迅速,减少通道干扰。
应用定位:大型科研项目、临床分子诊断、基因表达谱研究、高通量病原体筛查。
优势:一次性处理样本多,适合中心实验室或需要批量检测的单位。
货号:05815916001
通量:固定 96 孔平台,兼容标准 PCR 板或 8 联管,灵活适配小批量实验。
用户界面:彩色触屏+直观图形化菜单,新用户也能快速掌握操作。
结构特点:体积小,桌面放置即可运行,维护简便。
应用定位:中小型科研团队、教学实验室、常规分子检测。
优势:成本低、上手快、实验室占地少。
二手罗氏 qPCR 仪对于预算有限但追求性能的实验室来说,有以下价值:
显著降低成本
新机价格通常在几十万元人民币,而二手设备仅需其三分之一到一半的预算。
性能与耐用性
罗氏设备寿命长、核心部件耐用,只要维护得当,二手机依然能保持稳定表现。
备件与耗材易获取
由于用户基数大,耗材供应和第三方维修渠道丰富,维护成本低。
部署周期短
二手设备通常现货供应,安装调试后即可投入使用,无需漫长的交货等待。
温控精度
采用高精度半导体热循环技术,温度偏差可控制在 ±0.25°C 以内,保证 Ct 值稳定。
多重检测能力
光学模块可支持多达 6 种荧光通道,实现一管多靶标检测,显著提高效率。
信号灵敏度
检测下限可低至单拷贝水平,适合低浓度样本检测。
软件分析功能
从扩增曲线到熔解曲线,从相对定量到 SNP 分型,分析模块完整且易用。
耐用结构设计
光学组件与热循环模块密封良好,减少灰尘和湿气影响,延长使用寿命。
生命科学研究
基因表达定量分析
转录组验证
拷贝数变异研究
临床与公共卫生
病原体载量检测(如流感病毒、SARS-CoV-2)
遗传病基因突变筛查
肿瘤分子标志物分析
农业与食品安全
转基因成分检测
食源性致病菌检测
动植物疫病监测
环境监测
水质微生物污染监测
病原体环境溯源调查
开机前检查
确保样品架、光学模块干净无尘,防止信号干扰。
耗材匹配
选用厂家推荐或兼容性验证过的反应板、管、封膜,防止蒸发或漏液。
定期校准
每 6–12 个月进行一次温控与光学校准,确保数据精度。
软件维护
保持分析软件版本更新,以获取新功能和更好兼容性。
运输与存储
搬运时固定光学和热循环模块,存放在干燥恒温环境。
无论是高通量的 LightCycler 480 II,还是灵活易用的 LightCycler 96,二手罗氏荧光定量 PCR 仪都能在合理预算内提供稳定可靠的分子检测能力。前者适合中心实验室和大规模筛查项目,后者更适合中小型实验室的日常检测与培训应用。
在采购时,结合实验需求、预算、样本量与未来扩展方向进行选择,再配合到位的验机与维护流程,就能在不牺牲性能的前提下,实现检测能力与成本控制的双赢。
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