——LightCycler 480 II 与 LightCycler 96
罗氏(Roche)在荧光定量 PCR(qPCR)领域具有丰富经验,其 LightCycler 系列产品凭借稳定的温控性能、精确的光学检测系统和易用的软件平台,广泛应用于分子生物学、遗传学、医学检测、食品安全和环境监测等领域。对于预算有限或希望快速扩充检测能力的实验室来说,购买二手罗氏荧光定量 PCR 仪是一种性价比极高的选择。
本文将详细介绍两款常见的二手罗氏 qPCR 机型——LightCycler 480 II(货号:05015278001) 和 LightCycler 96(货号:05815916001),包括其功能特点、适用场景、操作要点及使用建议。
货号:05015278001
定位:高通量实时荧光定量 PCR 系统
适用场景:大规模样品检测、科研与临床诊断、需要多板型适配的多领域实验室。
高通量能力
可支持 96 孔、384 孔板型以及多种格式的反应管,单次运行可同时检测数百个样品,非常适合基因表达分析、大规模 SNP 分型、基因拷贝数检测等需要高批量处理的实验。
先进的光学系统
采用多通道光学检测(常见为 5 色通道),可同时检测多种荧光信号,实现多重 qPCR 分析。其光学均一性和灵敏度高,可有效降低孔间差异。
灵活的程序设计
用户可根据实验需求自定义温度梯度、荧光采集点和循环次数,适配 SYBR Green、TaqMan、FRET 等多种检测化学方案。
强大的数据分析功能
配套软件提供绝对定量、相对定量、基因分型、熔解曲线分析等多种分析模块,可自动生成标准曲线、计算 Ct 值、分析基因表达倍数变化。
温控精准
升降温速率高,温度控制精度可达 ±0.1℃,确保扩增反应的重复性和可靠性。
基因表达分析:使用内参基因归一化,分析目标基因的表达差异。
SNP 分型:通过熔解曲线或探针检测进行基因型判定。
病原体检测:适用于病毒、细菌等核酸检测,包括临床分子诊断。
转基因检测:可在食品或农作物中检测转基因序列。
样品准备
确保反应体系配制准确无误,模板纯度高,反应管密封良好,避免蒸发。
光学模块保养
定期清洁样品槽和光学窗口,避免灰尘或样品残留影响荧光采集。
温控系统维护
保证通风口畅通,长期不用时应封存防潮。
软件熟练操作
学习使用其分析模块,可显著提高数据处理效率。
货号:05815916001
定位:中等通量实时荧光定量 PCR 仪
适用场景:中小型实验室、日常检测、教学及常规科研任务。
操作简便
采用直观的图形化界面,适合不同经验水平的实验人员快速上手。
配套软件可直接引导用户设置程序、分配样品布局并自动生成结果。
通量适中
支持 96 孔板或常规 8 连管,既满足日常检测需求,又避免过高的运行成本。
多通道检测
一般配备 4–5 色光学通道,兼容多种荧光探针和染料,可进行多重检测。
稳定的温控性能
温度均一性高,孔间差异低于 ±0.2℃,确保重复性。
网络化管理
支持数据联网传输和远程访问,方便实验室信息化管理和多点协作。
常规基因定量分析:如检测目标基因在不同处理条件下的表达变化。
病原体快速筛查:在食品检测、临床快速检测中应用广泛。
教学与培训:界面友好,便于在教学实验中演示 qPCR 原理与操作流程。
快速上手
新手可使用默认程序模板,根据试剂说明调整退火温度和循环次数。
数据安全
建议定期备份数据文件,并妥善保存板布局文件以便重复分析。
维护习惯
实验结束后应及时清洁样品区,避免长时间残留液体或灰尘。
选购前检测
检查温控均一性、光学通道功能是否正常。
查看运行记录,确认加热模块和光源未接近寿命终点。
核对软件授权是否完整。
耗材与兼容性
购买前确认可兼容的反应板、试剂品牌及耗材规格,以免后续使用受限。
售后与配件
优先选择有维修保障或配件供应的渠道,减少维护风险。
特性 | LightCycler 480 II | LightCycler 96 |
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通量 | 高(96/384孔板) | 中(96孔板/8连管) |
光学通道 | 多达5色,适合复杂多重分析 | 4–5色,适合常规多重检测 |
适用场景 | 大规模科研、临床高通量检测 | 常规检测、教学、日常科研 |
操作难度 | 略高,需要一定培训 | 界面友好,上手快 |
数据分析 | 功能丰富,模块化分析 | 功能简洁,适合基础分析 |
程序优化:针对不同实验(如基因表达、病原体检测、SNP分型)建立独立的模板程序。
温控梯度实验:在新项目中先做退火温度优化,提高特异性和扩增效率。
定期校准:建议每半年或一年进行一次光学和温控系统的校准。
数据管理:二手设备可能无长期质保,建议每次运行后立即保存并备份数据,防止软件或硬盘故障造成丢失。
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