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发布时间：2024/11/25
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赛默飞 7500 荧光定量 PCR 仪（Thermo Fisher Scientific 7500 Real-Time PCR System）是一款经典的实时荧光定量 PCR 仪器，广泛应用于基因表达分析、病原体检测、突变筛查、基因分型和药物研发等领域。7500 系列 PCR 仪通过实时监测扩增过程中的荧光信号，精确定量目标核酸的浓度，是分子生物学研究和临床诊断的核心工具之一。
赛默飞 7500 荧光定量 PCR 仪以其高灵敏度、高特异性和强大的数据分析能力而受到科研人员的青睐。它支持多种实验类型，包括相对定量、绝对定量、突变分析和熔解曲线检测，能够满足从基础科研到临床诊断的多种需求。
实时检测：实时监控荧光信号，精确定量目标核酸。
多通道检测：支持多色荧光通道，用于多重实验设计。
快速模式：部分型号支持快速运行模式，将实验时间缩短至30分钟。
灵活性强：支持多种荧光染料和探针技术，包括 TaqMan 探针和 SYBR Green。
数据处理能力强：内置软件提供全面的 Ct 值分析、标准曲线绘制和结果输出功能。
支持多色荧光检测，标准配置包括 5 个荧光通道：
FAM、SYBR Green、VIC、HEX、ROX 等染料。
灵敏度高，能够精确检测低丰度核酸。
温度范围：4℃ 至 100℃，适应各种实验需求。
温度均匀性：±0.5℃，确保所有样品反应一致。
标准模式：适合所有常规实验。
快速模式：优化热循环流程，将实验时间缩短至 30 分钟。
96 孔光学反应板，适合中等通量实验室。
实时采集荧光信号，生成扩增曲线、熔解曲线和标准曲线。
数据精确可靠，支持相对定量、绝对定量和基因分型分析。
在 PCR 扩增的每个循环中实时检测荧光信号，监控目标核酸的累积量。
荧光信号与目标核酸的初始浓度呈正比，支持精确定量分析。
SYBR Green 染料法：
荧光染料嵌入双链 DNA，发出荧光信号。
优点：实验简单，成本低。
缺点：可能受到非特异性扩增干扰。
TaqMan 探针法：
探针通过荧光基团和猝灭基团的分离发出荧光信号。
优点：特异性高，结果更可靠。
缺点：探针设计和合成成本较高。
熔解曲线分析用于验证扩增特异性，单一峰值表明扩增产物特异性好。
通过优化热循环程序，7500 系列的快速模式可在 30 分钟内完成实验，极大提高了实验室的工作效率。
软件自动生成 Ct 值和标准曲线，并可导出扩增曲线和熔解曲线等实验数据。
核酸提取：从样品中提取 DNA 或 RNA，确保纯度和浓度符合实验要求。
逆转录（针对 RNA 样本）：将 RNA 转录为 cDNA。
配制 PCR 反应液，包括：核酸模板、引物、荧光染料或探针、dNTP、缓冲液和 Taq DNA 聚合酶。
按规定体积分装到 96 孔反应板中，并密封。
在软件中选择实验类型（如相对定量、绝对定量或基因分型）。
设置荧光通道和样品信息（样品名称、分组等）。
输入热循环程序，包括变性、退火和延伸阶段的温度和时间。
将反应板放入仪器样品舱，启动实验。
实验运行时，实时采集荧光信号，生成扩增曲线。
实验完成后，使用软件分析 Ct 值、标准曲线、熔解曲线等数据。
输出实验报告或导出数据文件。
通过实时检测基因的表达水平，用于研究基因调控机制和疾病标志物。
快速检测病毒和细菌 DNA 或 RNA，用于传染病诊断（如检测）。
检测基因突变和多态性（SNP），广泛应用于遗传性疾病研究和癌症诊断。
测量特定基因在药物处理下的表达变化，用于筛选药物靶点。
检测食品中的病原体或转基因成分，监测环境样本中的污染物。
高灵敏度与高特异性
光学系统灵敏度高，能够检测低丰度核酸模板。
TaqMan 探针法确保实验结果的特异性。
快速运行
快速模式缩短实验时间，提高实验室效率。
易用性
用户界面友好，支持一键设置和自动化数据分析。
灵活性
兼容多种荧光染料、探针和实验类型，适合多样化实验需求。
可靠性
数据稳定性高，结果重复性好，适合科研和临床应用。
样品准备：确保核酸提取的纯度和浓度符合实验要求，避免抑制剂干扰 PCR 反应。
试剂质量：使用新鲜的 PCR 试剂，避免试剂降解导致实验失败。
反应板密封：确保光学反应板密封良好，防止蒸发或气泡干扰荧光检测。
定期维护：清洁光学窗口，校准温控模块，确保仪器性能稳定。
赛默飞 7500 荧光定量 PCR 仪以其强大的检测能力和高效的数据分析功能，为分子生物学研究和临床应用提供了可靠的解决方案。无论是基因表达分析、病原体检测还是药物研发，7500 系列都能满足实验室的多种需求。其快速模式、灵活性和高灵敏度，使其成为科研和诊断领域中广泛应用的经典 PCR 仪器之一。
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