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Product Center实了个验通用型抗体稀释液
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应用领域 | 医疗卫生,环保,生物产业,制药,综合 |
通用型抗体稀释液(15 mL)是一种专为免疫检测实验设计的预制试剂,用于稀释抗体(包括一抗和二抗)以达到最佳工作浓度,同时保持抗体的活性和特异性。这种稀释液适用于多种实验技术,如Western blot、ELISA、免疫组化(IHC)和免疫荧光(IF),能够提供稳定的环境,确保抗体在检测中的高效结合和低背景信号。以下是对通用型抗体稀释液的详细介绍。
通用型抗体稀释液是一种即用型的缓冲液,已经过优化和预配制,不仅能够稳定抗体,还能够减少非特异性结合。它通常包含缓冲系统、蛋白质稳定剂、盐类和去污剂的组合,这些成分共同作用,提供了一个理想的抗体工作环境,特别适合在各种免疫检测中使用。
PBS(磷酸盐缓冲液)或TBS(Tris缓冲盐溶液):这两种缓冲液常用来维持稀释液的pH稳定,确保抗体在稀释后能够保持其活性和特异性。一般稀释液的pH值在7.4-8.0之间,适合大多数抗体的工作环境。
BSA(牛血清白蛋白):一种常见的蛋白质稳定剂,能够保护抗体的结构,防止其在稀释过程中失活或降解。BSA还能减少抗体与非特异性位点的结合,从而降低背景噪声。
鱼明胶:作为替代选择,适合一些特殊应用场合,如防止哺乳动物抗体的交叉反应。
NaCl(氯化钠):提供适当的离子强度,帮助维持抗体的溶解性和功能活性,同时避免由于离子强度过高或过低而导致的非特异性结合。
Tween-20:一种非离子去污剂,常用于减少抗体与非特异性位点的结合,提高检测的特异性。适量的Tween-20可以帮助抗体在固相表面均匀分布,而不会干扰其与目标抗原的结合。
在Western blot实验中,通用型抗体稀释液用于稀释一抗和二抗,确保抗体在孵育过程中能够有效识别并结合到目标蛋白。稀释液的使用可以显著降低背景噪声,提高条带的清晰度和信号特异性。
在酶联免疫吸附测定(ELISA)中,通用型抗体稀释液用于稀释检测抗体或酶标二抗,以确保在固相支持物(如96孔板)上的均匀结合和低背景反应,从而提高检测的灵敏度和特异性。
在IHC和IF实验中,通用型抗体稀释液用于稀释用于检测细胞或组织切片的抗体,确保抗体在染色过程中的均匀分布和特异性结合。这对于获得清晰的染色结果和准确的细胞定位至关重要。
使用通用型抗体稀释液进行抗体稀释的步骤如下:
抗体准备:根据实验需要,从抗体储备溶液中取出适量抗体。
稀释抗体:将抗体加入到适量的通用型抗体稀释液中,混合均匀。通常稀释比例根据抗体的推荐工作浓度进行调整,例如1:500,1:1000等。
抗体孵育:将稀释后的抗体溶液直接用于样品的孵育步骤。在Western blot中,孵育时间一般为1-2小时或过夜,在ELISA、IHC和IF中则根据实验要求调整。
保存抗体溶液:稀释后的抗体溶液应根据实验需求立即使用或短期保存(4°C)。对于长期保存,建议重新配制以确保抗体活性。
通用型抗体稀释液无需额外配制或调整,直接使用,大大简化了实验准备步骤,并确保了实验条件的一致性。
通过优化的蛋白质稳定剂和去污剂组合,稀释液能够显著降低非特异性结合,减少背景噪声,确保检测的高特异性和清晰的信号。
适用于Western blot、ELISA、IHC和IF等多种免疫检测实验,提供了多功能的解决方案,能够满足不同实验室的需求。
稀释液中的稳定剂如BSA能够有效保护抗体结构,防止其在稀释过程中失活,从而确保抗体在实验过程中的高效性。
储存条件:通用型抗体稀释液应存放在4°C冰箱中,并避免长时间暴露在光线下。使用前确保溶液均匀混合。
避免交叉污染:操作过程中,使用独立的移液器和试管,避免不同抗体溶液间的交叉污染。
稀释比例调整:根据实验的具体需求和抗体的工作浓度,适当调整稀释比例,以达到最佳效果。
在Western blot实验中,研究人员使用通用型抗体稀释液稀释了一抗和HRP标记的二抗。稀释后的抗体溶液在PVDF膜上孵育,最终获得了高特异性、低背景的蛋白质条带,显著提高了实验的信噪比。
在ELISA检测中,通用型抗体稀释液用于稀释检测抗体,帮助研究人员获得了高灵敏度的检测结果,特别是在检测低丰度目标蛋白时,稀释液有效减少了非特异性信号,提高了数据的准确性。
通用型抗体稀释液(15 mL)是一种关键的实验试剂,在免疫检测中扮演着重要角色。它不仅简化了抗体稀释步骤,还通过优化的配方减少了背景噪声,提高了信号的特异性。无论是在Western blot、ELISA,还是在IHC和IF实验中,通用型抗体稀释液都为研究人员提供了可靠且高效的解决方案,确保实验结果的准确性和可重复性。