赛默飞 Countess 3 FL自动细胞计数仪使用教程

赛默飞 Countess 3 FL 自动细胞计数仪 是一款高精度、自动化的细胞计数和分析工具，结合了荧光显微镜技术和先进的图像分析功能。以下是使用 Countess 3 FL 自动细胞计数仪的详细教程，帮助用户快速上手并有效利用仪器进行细胞分析。

1. 开始前准备

在使用Countess 3 FL之前，确保仪器和样本准备好。

1.1 仪器准备

1. 接通电源：确保仪器连接电源，并开启电源按钮。

2. 检查仪器状态：在仪器启动后，等待系统自检完成。此时屏幕上会显示仪器的欢迎界面，确认没有错误提示。

3. 清洁样本腔和显微镜镜头：使用适当的清洁工具（如无尘布和清洁液）清洁仪器的显微镜镜头和样本腔，避免灰尘影响结果。

1.2 样本准备

1. 准备细胞悬液：确保细胞悬液均匀，必要时使用离心机沉淀细胞，去除上清液。

2. 选择适当的染料：根据需要使用台盼蓝或荧光染料（如Calcein-AM、PI等），将染料加入细胞悬液中，帮助区分活细胞与死细胞。

2. 操作步骤

2.1 启动仪器

1. 打开 Countess 3 FL，并触摸屏幕上的 "Start" 按钮进入主菜单。

2. 在主菜单中，选择适合你实验的计数模式（如台盼蓝染色、荧光染料分析等）。

2.2 样本加载

1. 将准备好的细胞悬液轻轻滴入计数板或样品腔。确保液体的表面平整，避免气泡干扰。

2. 使用Countess 3 FL的专用样品腔盖住样品，确保没有气泡。插入样品腔到仪器的扫描区域。

2.3 设置计数参数

1. 选择适合的实验模式：

• 普通细胞计数模式：选择“台盼蓝"或其他染料检测活死细胞的模式。

• 荧光染料模式：如果使用了荧光染料（如Calcein-AM、PI等），选择相应的荧光通道（如绿色或红色），以便通过荧光信号分析细胞活性。

2. 调整其他实验设置（如增益、曝光时间等），以确保荧光信号清晰可见，细胞图像清晰。

2.4 运行计数

1. 按下 “Start Counting" 按钮，仪器将自动开始图像采集与分析。Countess 3 FL会扫描样品中的细胞图像，并进行自动识别和计数。

2. 在分析过程中，Countess 3 FL会自动显示细胞数量、活细胞和死细胞的比例、细胞大小分布等数据。

2.5 查看分析结果

1. 分析完成后，仪器会自动生成详细的结果报告，并显示在触摸屏上。

2. 查看报告：报告包括细胞总数、活细胞数、死细胞数、活细胞比例等。你还可以查看细胞的大小分布、形态等详细信息。

3. 调整报告设置：根据需要，您可以选择导出数据或调整报告设置。

2.6 导出数据

1. 点击“Export"按钮，将实验数据导出为 CSV 格式文件。

2. 通过USB或网络将文件转移到电脑上，以进行进一步分析。

3. 高级功能与设置

3.1 多通道荧光染料分析

如果您正在使用多个荧光染料（如Calcein-AM、PI、Hoechst等），可以选择适当的荧光通道进行细胞分析：

1. 在设置中选择“Fluorescent Mode"并每个通道的染料类型。

2. 仪器会自动切换不同的荧光通道，识别不同的细胞群体（例如，活细胞、死细胞、细胞核等）。

3.2 细胞大小和形态分析

通过细胞大小和形态分析功能，您可以评估细胞的健康状况和群体分布：

1. 选择“Size Distribution"模式，仪器会根据细胞大小对样本进行分类，并生成直方图。

2. 进一步分析细胞的形态特征，观察细胞是否有异常形态（如细胞碎片等）。

4. 维护与保养

4.1 清洁

定期清洁Countess 3 FL仪器，特别是显微镜镜头和样品腔：

1. 用无尘布清洁显微镜镜头，避免灰尘和污渍影响图像质量。

2. 清洁样品腔，确保没有残留的样品或染料，避免交叉污染。

4.2 校准

Countess 3 FL具有自动校准功能，但建议定期进行校准检查，确保仪器的计数结果准确：

1. 使用标准细胞悬液进行校准，检查仪器计数的准确性。

2. 根据仪器使用频率，建议每隔一段时间重新校准。

4.3 软件更新

定期检查并更新仪器的操作系统和分析软件：

1. 根据赛默飞公司发布的软件更新通知，下载并安装最新的软件版本，确保仪器的功能和性能得到优化。

5. 常见问题解答

5.1 仪器无法启动

• 确保电源插头连接正确，电源开关已打开。

• 检查电源指示灯是否亮起，确保电源正常。

5.2 样本图像模糊

• 检查显微镜镜头是否干净，如有灰尘，使用无尘布轻轻擦拭。

• 检查样品腔，确保没有气泡，并确保样本液面平整。

5.3 计数结果与预期差异

• 检查染料的使用是否正确，确保染料与细胞的匹配。

• 确保选择了正确的计数模式，并且设置了合适的参数（如荧光增益、曝光时间等）。

• 确保样品均匀，并且细胞浓度在适合仪器测量的范围内。

总结

赛默飞Countess 3 FL自动细胞计数仪通过自动化操作、荧光显微技术、智能图像分析，提供高效、精确的细胞计数和分析功能。通过本文提供的步骤，您可以快速上手并有效利用Countess 3 FL进行细胞研究。定期维护、更新和适当的设置调整，能够确保仪器长期稳定地为您提供精准的实验结果。