赛默飞Thermo LightCycler® 480 II 实时荧光定量PCR仪介绍

赛默飞Thermo LightCycler® 480 II 实时荧光定量PCR仪介绍

赛默飞（Thermo Fisher Scientific）的LightCycler® 480 II实时荧光定量PCR仪是一款高性能、多功能的PCR检测仪器，专为基因表达研究、基因分型、拷贝数变异分析、突变检测等实验需求而设计。作为分子生物学研究中广泛应用的仪器之一，LightCycler® 480 II以其高通量、高灵敏度、强大的多重检测能力以及快速热循环技术，在科研、临床和工业检测领域表现出色。

一、仪器概述

LightCycler® 480 II实时荧光定量PCR仪结合了先进的光学检测系统与快速温控技术，是一款为高精确度核酸定量分析而设计的设备。该仪器支持96孔和384孔反应板，能够适应不同规模的实验需求，同时以其出色的荧光检测能力和数据分析功能，为分子生物学研究提供了可靠的技术平台。

这款设备可以实时监测PCR扩增过程中荧光信号的变化，帮助研究人员动态、定量分析目标基因的表达或突变状态。无论是基础研究还是临床诊断，LightCycler® 480 II都能够为科学家提供高效、稳定和可靠的数据支持。

二、技术特点

1. 高性能光学检测系统

LightCycler® 480 II配备高灵敏度光学模块，支持多通道荧光检测，可对多个目标基因进行同时监测。

• 高灵敏度检测：适合低丰度基因的分析，可灵敏检测低拷贝数样本。

• 多通道支持：支持多达5种荧光染料的同时检测，适合多重PCR实验。

• 荧光染料兼容性：支持SYBR Green、TaqMan探针、EvaGreen以及其他常见荧光标记物。

2. 快速热循环技术

LightCycler® 480 II采用高效热循环模块，能够快速升温和降温，大幅度缩短PCR实验时间，提高检测效率。

• 快速反应速度：每次实验的反应时间显著缩短，同时保持较高的扩增效率。

• 精确温控系统：温控精度达到±0.1°C，确保PCR扩增的高稳定性和重复性。

3. 多通量配置

该仪器支持两种孔板配置，满足不同实验室规模需求：

• 96孔板：适合中等规模实验和科研使用。

• 384孔板：为高通量实验设计，支持大规模筛查和复杂检测。

4. 智能数据分析

LightCycler® 480 II配备功能全面的数据分析软件，能够满足用户的多样化数据处理需求。

• Ct值分析：快速、准确地识别循环阈值（Ct值），提供可靠的扩增曲线。

• 熔解曲线分析：用于扩增反应的特异性验证，帮助识别非特异性产物或污染。

• 绝对与相对定量：支持基于标准曲线的绝对定量以及2^-ΔΔCt法的相对定量分析。

• 突变检测和基因分型：支持高分辨率熔解曲线（HRM）分析，用于基因突变检测和基因分型研究。

5. 灵活性与兼容性

LightCycler® 480 II仪器设计灵活，适应多种实验类型和需求：

• 多种反应模式：支持标准PCR、实时定量PCR、多重PCR、熔解曲线分析等。

• 兼容不同实验条件：支持多种荧光标记体系和反应方案。

• 自动化扩展：可与实验室自动化设备集成，进一步提高实验效率。

三、核心功能

1. 基因表达分析

LightCycler® 480 II能够实时监控基因表达水平的变化，适用于各种基因表达研究场景。

• 相对定量：对样本间基因表达水平差异进行分析。

• 绝对定量：通过标准曲线直接计算基因拷贝数。

2. 突变检测

该仪器可以灵敏检测低频率突变，适用于点突变、插入/缺失突变等多种基因突变类型的研究。

• HRM分析：高分辨率熔解曲线技术能够高效区分样本中的突变和野生型序列。

• 单核苷酸多态性（SNP）检测：快速准确识别样本中的特定基因变异。

3. 基因分型

LightCycler® 480 II支持基因分型实验，通过分析荧光信号，对样本进行遗传多态性分型。

4. 拷贝数变异（CNV）分析

通过定量PCR实验，该仪器能够检测基因组中目标基因的拷贝数变化，帮助研究拷贝数扩增或缺失的基因。

5. 病毒载量检测

LightCycler® 480 II被广泛应用于病毒载量分析，通过定量检测病毒核酸，监测感染状况和治疗效果。

四、技术参数

以下为LightCycler® 480 II的主要技术参数：

五、仪器优势

1. 高灵敏度与高通量

LightCycler® 480 II具检测灵敏度和高通量能力，可同时处理大批量样本，显著提高实验效率。

2. 多功能性

该仪器支持多种实验类型，包括基因表达分析、基因分型、突变检测和拷贝数分析等，覆盖了绝大多数PCR应用场景。

3. 操作简便

仪器的设计注重用户体验，配套软件界面直观，实验设置和数据分析简便易用。

4. 实验结果可靠

高精度的温控系统和灵敏的光学模块确保了实验结果的准确性和可重复性。

5. 灵活的扩展能力

兼容多种耗材和反应方案，支持与自动化工作站集成，适应不同实验室的需求。

六、应用领域

LightCycler® 480 II在多个领域得到了广泛应用：

1. 基础研究

• 基因表达调控研究

• 基因功能研究

• 遗传多样性分析

2. 医学研究

• 肿瘤标志物检测

• 遗传疾病相关基因分析

• 病毒载量检测和病原体定量

3. 药物开发

• 药物基因组学研究

• 个体化医疗相关基因研究

• 药物代谢相关基因分型

4. 工业检测

• 食品安全检测中的病原体分析

• 环境样本中的微生物检测

七、总结

赛默飞LightCycler® 480 II实时荧光定量PCR仪凭借其高灵敏度、多通道检测、快速热循环技术和强大的数据分析能力，成为分子生物学和基因组学研究中的重要工具。它不仅能够满足基础科研需求，还在临床和工业检测领域发挥了重要作用。

无论是小规模实验还是大规模高通量筛查，LightCycler® 480 II都能够为用户提供可靠的结果和高效的实验体验，为基因研究和诊断提供全面的技术支持。